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Inertsil ODS-3型液相色谱柱分离磺胺抗生素，分离效果不佳。求一个梯度洗脱方法已有2人参与
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刚接触液相色谱，照搬了文献上梯度分离方法做5种磺胺类抗生素的标准样品，结果是完全不能分开，出了一个长达数分钟的大峰（见下图）。用该梯度方法做单个标样，标样都在8.9分钟左右出峰，出峰时间非常接近。想改进这个梯度方法把5种标样完全分离，可是不会改。求高手指导一下怎样改梯度分离方法呀？ 文献上的原方法 ： 流速 0.2ml/min 柱温40度 时间 流动相甲醇（含0.2%甲酸）的比例 流动相水（含0.2%甲酸）的比例 0.01 25 75 5 40 60 20 80 20 22 80 20 22.01 25 75 30 25 75 文献上色谱柱是shim-pack VP-ODS （2mm*250mm i.d.5微米） ， 我实验室柱子是inertsil ODS-3 ，它的填料是在高纯度球状硅胶上化学修饰具通用性的十八烷基填料，实现了理想的端基封尾处理,无论是碱性化合物还是酸性化合物吸附都较小，是方法开发的首选色谱柱。（关于这柱子更详细信息百度可以查到）（我实验室柱子尺寸：4.6mm i.d.，150mm色谱柱长度，5uM色谱填料粒径） 我照搬文献上原方法，结果分离效果非常不理想，如何改进原方法？  @wyy080214@学术巨星 |
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