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俊俊思密达

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by A00696 at 2018-01-31 09:44:16
最近在做丝状真菌原生质体转化,由于孢子形状椭圆形近似圆形,所以打算用菌丝做。将孢子直接放到LB摇瓶中摇 ,瓶子放了0.1mm的玻璃珠,成大小不一的菌丝球,对球未做任何处理直接酶解 时用的是 0.1%Driselase +0.05 ...

我也和你一样的问题,很绝望,希望看到了能给我一丝丝帮助

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11楼2018-04-25 01:25:14
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俊俊思密达

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Zhenhui_Ren at 2018-03-13 22:10:33
可以分享一下原生质体制备的详细过程吗?

希望能帮助解决一下原生质体制备问题

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12楼2018-04-25 01:26:35
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闹仔爸

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 俊俊思密达 at 2018-04-25 01:26:35
希望能帮助解决一下原生质体制备问题
...

不清楚你做的什么菌,我做的时候加酶量是15%,3h
13楼2018-05-23 16:03:48
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齐齐(?ω?)

新虫 (著名写手)

调高潮霉素浓度,筛两次试试

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14楼2018-05-30 21:56:56
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an安琳

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by Rexness at 2018-04-08 20:01:40
你拿到转化子的时候可提取DNA用片段内部引物对其进行鉴定?我做的时候都是从转化板上单独挑出来进行一次鉴定才能初步确认是否敲除成功。

你好 请问鉴定是否敲除成功 除了提DNA 你还用别的方法了吗 谢谢
15楼2018-07-17 22:41:47
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小耗子偷灯油

新虫 (初入文坛)

您好我想问一下我在做原生质体转化的时候,转不进去,转潮霉素的空载体也转不进去,是因为什么啊?

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16楼2018-08-23 21:49:33
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汤锐5211314

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
15楼: Originally posted by an安琳 at 2018-07-17 22:41:47
你好 请问鉴定是否敲除成功 除了提DNA 你还用别的方法了吗 谢谢...

southern

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17楼2018-11-05 14:56:36
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汤锐5211314

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 小耗子偷灯油 at 2018-08-23 21:49:33
您好我想问一下我在做原生质体转化的时候,转不进去,转潮霉素的空载体也转不进去,是因为什么啊?

用的PEG吗?是的话看看这个有问题吗?

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18楼2018-11-05 14:57:18
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求学的咘咘

新虫 (初入文坛)

想问一下楼主的问题解决了吗?可以交流一下吗?QQ2074827767
19楼2022-01-06 19:59:56
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