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渊博震天

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[交流] ppic9k质粒提取以及双酶切后电泳图不及预期

如电泳图(1%琼脂糖凝胶电泳)所示,中间四个为ppic9k质粒(9276kb)电泳图,右边两个为用SnaB I 和Not I 的双酶切ppi9k的质粒电泳图。

我想请问,ppic9k电泳条带就是在10000以上吗?但是双酶切之后还在10000以上这就说不过去了

ppic9k质粒提取以及双酶切后电泳图不及预期
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青松573

木虫 (正式写手)


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我后面打算提质粒pcr验证下或者送测序,我觉得我的可能是转化过程出了问题;我也是转入的DH5α,长得好慢又小。

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10楼2018-01-24 13:28:57
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青松573

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
渊博震天: 金币+2 2018-01-24 07:05:34
酶切前与酶切后片段大小差异太小了肉眼不容易看出来的呀

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2楼2018-01-24 04:44:10
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渊博震天

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2楼: Originally posted by 青松573 at 2018-01-24 04:44:10
酶切前与酶切后片段大小差异太小了肉眼不容易看出来的呀

但是酶切后的质粒跑胶还是大于10000的

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3楼2018-01-24 07:06:18
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青松573

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
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渊博震天: 金币+5 2018-01-24 10:39:27
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3楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-01-24 07:06:18
但是酶切后的质粒跑胶还是大于10000的
...

跑电泳的时候闭环在最前面,开环中间,线性最后,所以快慢与这个DNA的结构有关,个人理解,仅供参考。

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4楼2018-01-24 08:29:29
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chengzi0223

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
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渊博震天: 金币+2 2018-01-24 10:38:23
你这个质粒上不会本来就带走基因吧,送去测个序吧

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5楼2018-01-24 09:53:06
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渊博震天

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引用回帖:
5楼: Originally posted by chengzi0223 at 2018-01-24 09:53:06
你这个质粒上不会本来就带走基因吧,送去测个序吧

直接买公司的,之后我转化DH5a里边提取的

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6楼2018-01-24 10:38:57
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渊博震天

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2楼: Originally posted by 青松573 at 2018-01-24 04:44:10
酶切前与酶切后片段大小差异太小了肉眼不容易看出来的呀

小伙子,好巧啊

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7楼2018-01-24 10:41:19
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青松573

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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7楼: Originally posted by 渊博震天 at 2018-01-24 10:41:19
小伙子,好巧啊
...

因为最近刚好也在做酵母表达,我的是目的片段连上了,就是转化后,菌落PCR没条带。

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8楼2018-01-24 11:35:41
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渊博震天

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8楼: Originally posted by 青松573 at 2018-01-24 11:35:41
因为最近刚好也在做酵母表达,我的是目的片段连上了,就是转化后,菌落PCR没条带。
...

那质粒验证呢?

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9楼2018-01-24 12:49:27
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