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李建波

新虫 (初入文坛)

[求助] 小麦染色体非变性原位杂交

最近在做小麦染色体非变性原位杂交(ND-FISH),Oligo-pTa535信号一直很好,但是Oligo-pSc119.2信号一直有背景色。求助大神,帮我分析一下原因,万分感谢!

小麦染色体非变性原位杂交
4.png


小麦染色体非变性原位杂交-1
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小麦染色体非变性原位杂交-2
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小麦染色体非变性原位杂交-3
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踏踏实实学习!
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781055707

木虫 (著名写手)

楼主,你的染色体是用什么试剂盒提取的呀。
采菊东篱下,悠然见南山。
2楼2017-11-13 08:43:52
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李建波

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 781055707 at 2017-11-13 08:43:52
楼主,你的染色体是用什么试剂盒提取的呀。

滴片,没有试剂盒
踏踏实实学习!
3楼2017-11-13 18:59:12
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scolandry404

新虫 (初入文坛)

可能是探针浓度过大,或者是洗脱强度不够导致的

发自小木虫IOS客户端
4楼2017-12-01 09:49:24
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jmagicking

新虫 (初入文坛)

李博,你好:
       看到你的做的结果,很是佩服。

我对这个计算很感兴趣,请教结果问题:
1、样本与处理是破坏了细胞,但是,没有破坏染色体。
2、样本是单细胞还是多细胞

#############
基于这样的技术是否可以进行单染色体分离?
5楼2017-12-01 20:21:17
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李建波

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by scolandry404 at 2017-12-01 09:49:24
可能是探针浓度过大,或者是洗脱强度不够导致的

哦,谢谢,我改变下浓度再试试
踏踏实实学习!
6楼2018-01-04 06:05:08
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李建波

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jmagicking at 2017-12-01 20:21:17
李博,你好:
       看到你的做的结果,很是佩服。

我对这个计算很感兴趣,请教结果问题:
1、样本与处理是破坏了细胞,但是,没有破坏染色体。
2、样本是单细胞还是多细胞

#############
基于这样的技术 ...

嗯,谢谢啊!

我是做小麦抗病性研究的,所用的材料是小麦的根尖分生组织区域(所以是多细胞);采用的方法是滴片法获得染色体,利用酶解破坏掉细胞壁,但没有破坏染色体。

应用一些相关的探针可以清楚地鉴定出每条小麦染色体,国内有些实验室利用显微切割已经可以分离单条染色体;我们老板也买了显微切割设备,最近正在实践中。
踏踏实实学习!
7楼2018-01-04 06:14:52
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