24小时热门版块排行榜     意得辑英文润色,师兄用过都说好

查看: 450  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

charles08

木虫 (著名写手)

[求助] 周质蛋白含量很高,但SDS-PAGE电泳检测却没有目的蛋白????已有2人参与

我的实验是目的基因在周质蛋白的表达,用渗透压休克法得到了周质粗蛋白溶液,测粗蛋白280有较为明显的含量:

         对照组BL21空菌处理的周质蛋白含量0.08左右,各转化子蛋白在4-5mg/ml.----------------按说这个含量应该说明蛋白在周质表达很明显啦,但是问题来

了,电泳跑胶出来看不到目的条带,不知是什么原因,请大家帮忙分析分析!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

版主 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by charles08 at 2017-11-15 02:02:42
对照组BL21即为阴性对照可以说明问题吗?测得它的粗蛋白与样品差异明显;另外,有个阳性对照的样品是有目的条带的...

我觉得还是以page为准吧,蛋白含量这个很粗糙了,你想啊,微生物培养过程的阶段很难掌控的,不同阶段差一点点蛋白含量组分就差别很大的..
6楼2017-11-15 11:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

lao-nan-hai

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有目标蛋白,没分离出来;没我目标蛋白,没表达

发自手机版WAP
让生命站立成树!
2楼2017-11-11 12:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lao-nan-hai at 2017-11-11 12:20:50
有目标蛋白,没分离出来;没我目标蛋白,没表达

什么意思,sorry!"有目标蛋白,没分离出来;没我目标蛋白,没表达
"
3楼2017-11-12 02:57:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用蛋白含量标定是否表达,显然是不正确的,细菌生长过程蛋白含量也在飙升,做个阴性对照吧。SDS没跑出来就说明没表达
4楼2017-11-13 09:01:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 35岁准备辞职考博,求骂醒! +63 air jet 2018-12-08 84/4200 2018-12-13 21:24 by yanghuimin
[有机交流] 有机实验的问题 +4 追风打月 2018-12-12 4/200 2018-12-13 20:09 by 天山明月
[基金申请] 请问2018年NSFC-河南联合基金,都收到评审结果邮件了吗? +9 zhendaodan 2018-12-12 14/700 2018-12-13 20:01 by xgw1111
[硕博家园] 母单 +44 Diligent南南 2018-12-09 63/3150 2018-12-13 15:13 by 吴璇1214
[职场人生] 一般高校教辅岗位,有什么好处? +6 jeff800_800 2018-12-10 10/500 2018-12-13 14:50 by bluice6
[电化学] 关于碳布电催化CO2RR的F.E问题 +3 lanyemm 2018-12-13 11/550 2018-12-13 14:43 by lanyemm
[硕博家园] 一起灌鸡汤 +14 candy55 2018-12-12 19/950 2018-12-13 14:13 by candy55
[论文投稿] 这个杂志的影响因子怎么查不到 +6 奎尔萨拉斯靴 2018-12-09 8/400 2018-12-13 07:56 by ZloveA
[考博] 现在面临读博和工作两个选择 +9 京暝天xia 2018-12-10 14/700 2018-12-13 02:59 by dalis 悦
[考博] 攻博计划书写的想哭 +14 若鱼666 2018-12-11 17/850 2018-12-12 21:13 by ljstrsz
[职场人生] 听说一口流利的英语能在职场中很加分? +7 pcr2907 2018-12-07 8/400 2018-12-12 16:30 by lzdfox
[论文投稿] 中科院jcr分区网站已公布,公众号还没更新 +14 aaa45688123 2018-12-11 24/1200 2018-12-11 22:22 by happy_0426
[复合材料] 多层复合材料力学性能求助? 5+3 虚度花 2018-12-11 5/250 2018-12-11 20:50 by 13813921817
[晶体] 测试晶体 +3 zmmlong 2018-12-10 3/150 2018-12-11 14:19 by damning
[论文投稿] 多久给编辑发邮件 +7 材料人ing 2018-12-10 17/850 2018-12-11 13:25 by kmght
[论文投稿] 论文大修,修改稿提交快了能不能行? +5 神之暗箭 2018-12-10 5/250 2018-12-10 23:59 by 范范1
[硕博家园] 全程15万的工程博士有没有必要读 +13 梦翎翊 2018-12-10 22/1100 2018-12-10 20:50 by socitey
[考博] 研究计划书 +4 笑晓儿 2018-12-07 6/300 2018-12-10 17:13 by zhangmaook
[考博] 硕博连读的请教 +4 啊文9995 2018-12-09 9/450 2018-12-10 10:15 by sanhaiwa7
[有机交流] 用DMF做酯水解的溶剂时如何后处理反应,? 9+4 公子_筱白 2018-12-07 10/500 2018-12-09 14:47 by 公子_筱白
信息提示
请填处理意见