24小时热门版块排行榜     石溪大学接受考研调剂申请>

【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
查看: 1576  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 周质蛋白含量很高,但SDS-PAGE电泳检测却没有目的蛋白????已有2人参与

我的实验是目的基因在周质蛋白的表达,用渗透压休克法得到了周质粗蛋白溶液,测粗蛋白280有较为明显的含量:

         对照组BL21空菌处理的周质蛋白含量0.08左右,各转化子蛋白在4-5mg/ml.----------------按说这个含量应该说明蛋白在周质表达很明显啦,但是问题来

了,电泳跑胶出来看不到目的条带,不知是什么原因,请大家帮忙分析分析!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by charles08 at 2017-11-15 02:02:42
对照组BL21即为阴性对照可以说明问题吗?测得它的粗蛋白与样品差异明显;另外,有个阳性对照的样品是有目的条带的...

我觉得还是以page为准吧,蛋白含量这个很粗糙了,你想啊,微生物培养过程的阶段很难掌控的,不同阶段差一点点蛋白含量组分就差别很大的..
6楼2017-11-15 11:55:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

lao-nan-hai

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有目标蛋白,没分离出来;没我目标蛋白,没表达

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
让生命站立成树!
2楼2017-11-11 12:20:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charles08

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lao-nan-hai at 2017-11-11 12:20:50
有目标蛋白,没分离出来;没我目标蛋白,没表达

什么意思,sorry!"有目标蛋白,没分离出来;没我目标蛋白,没表达
"
3楼2017-11-12 02:57:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用蛋白含量标定是否表达,显然是不正确的,细菌生长过程蛋白含量也在飙升,做个阴性对照吧。SDS没跑出来就说明没表达
4楼2017-11-13 09:01:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 重庆大学计算机学院2024博士招生 +4 y_y_y_yyy 2024-04-18 6/300 2024-04-23 16:31 by 让一切随风l
[考博] 山东大学化学与化工学院刘磊课题组博士研究生招生启事 +7 sdorganic 2024-04-17 9/450 2024-04-23 16:28 by 让一切随风l
[教师之家] 博士论文被抄袭 +16 和尚敲小木鱼 2024-04-22 26/1300 2024-04-23 15:59 by otani
[考研] 本科211 277分求调剂 +3 0854通信工程 2024-04-18 6/300 2024-04-23 15:39 by H.W.Y
[论文投稿] 研二光催化6月底四篇二区什么水平 5+3 wjtab 2024-04-22 7/350 2024-04-23 13:09 by 木炭萨姆
[考博] 申博成果界定是根据Jcr分区还是中科院分区 +4 我属驴核动力驴 2024-04-22 4/200 2024-04-23 12:18 by lyfbangong
[教师之家] 国内科研环境差导致国内科研水平差的根源 +8 zju2000 2024-04-18 8/400 2024-04-23 10:40 by Quakerbird
[基金申请] 特别资助审核状态 +12 pantray 2024-04-17 18/900 2024-04-23 09:50 by y20150913
[论文投稿] 编辑返稿让改格式,这个时候能大修内容吗? +6 双倍好运锦鲤 2024-04-17 9/450 2024-04-23 09:49 by fslaser
[论文投稿] Chemical Engineering Journal投稿3周了,一直显示With editor状态。这是送审了吗? 10+3 yifeng11 2024-04-20 7/350 2024-04-23 09:29 by bobvan
[教师之家] 河海大学常州校区新进的讲师待遇如何?考核要求如何? +3 德国小球迷 2024-04-19 18/900 2024-04-22 19:23 by ZHONGWU_U
[论文投稿] 无under review,直接DIP,咋么办。 +9 lizhengke06 2024-04-19 15/750 2024-04-22 17:18 by lizhengke06
[找工作] 化工专业 10+3 xiao太阳94 2024-04-18 7/350 2024-04-22 13:48 by mlnjut
[考研] 问题已经解决。 +13 lekinna 2024-04-19 30/1500 2024-04-22 13:09 by 矛dei到
[考研] 博士生招生!! +3 2458827884 2024-04-19 3/150 2024-04-22 12:37 by 钰波love
[硕博家园] 材料工程,二本硕士,值得读吗 +3 简风23 2024-04-20 6/300 2024-04-21 12:19 by 简风23
[公派出国] CSC在职申请求问 +8 Amber0919 2024-04-16 8/400 2024-04-20 18:33 by 371122gyd
[论文投稿] SCI 评审意见回复 模板 15+3 Kilig0317 2024-04-18 4/200 2024-04-19 08:46 by bobvan
[论文投稿] 发个文章,结果被某学报请的外审PUA了 +3 ziniu168 2024-04-18 8/400 2024-04-18 21:40 by xli1984
[论文投稿] 投稿求助 5+3 我是洲洲啊 2024-04-17 5/250 2024-04-18 17:13 by topedit
信息提示
请填处理意见