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姣可长点心吧

新虫 (初入文坛)

[交流] 膜片钳电生理测量技术操作交流

我是膜片钳新手,全细胞模式进行封接时,电极接触细胞电阻开始慢慢增大,什么时候就可以开始负压吸引了?电阻达到800兆欧的时候,我用注射器抽压,测试脉冲没有任何反应,电阻也没有变化,达不到1GΩ,然后再将电极往下移,电阻就上来了,可以在2GΩ左右维持一段时间,但有时也会突然出现断路信号,应该怎么操作才能得到稳定的封接和破膜?

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那半句誓言

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2楼2017-08-21 12:03:19
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姣可长点心吧

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
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2楼: Originally posted by 那半句誓言 at 2017-08-21 12:03:19
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谢谢,我看过一遍,也是按书中写得那样反复的实验,就是得不到全细胞记录,就是从电极接触细胞开始,就不会吸附破膜了,是用注射器通过很细的乳胶管与电极夹持器连接后抽吸施压,不知道是装置的问题还是细胞表面不干净呢,请问前辈有经验吗

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3楼2017-08-22 08:13:07
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那半句誓言

金虫 (正式写手)


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3楼: Originally posted by 姣可长点心吧 at 2017-08-22 08:13:07
谢谢,我看过一遍,也是按书中写得那样反复的实验,就是得不到全细胞记录,就是从电极接触细胞开始,就不会吸附破膜了,是用注射器通过很细的乳胶管与电极夹持器连接后抽吸施压,不知道是装置的问题还是细胞表面不 ...

我们做的是脑片 电极接触到细胞后 再下压一点 撤去正压后 阻值会上升一点 之后用200ml黄枪头插进软管用嘴吸

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4楼2017-08-22 10:35:20
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姣可长点心吧

新虫 (初入文坛)

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4楼: Originally posted by 那半句誓言 at 2017-08-22 10:35:20
我们做的是脑片 电极接触到细胞后 再下压一点 撤去正压后 阻值会上升一点 之后用200ml黄枪头插进软管用嘴吸
...

我也试试用嘴吸,如果电极接触细胞,然后下压阻值增大,不给负压也能增加到GΩ,也能稳定一段时间,再把电极上升后电阻会下来,这个GΩ是怎么出来的呢?可以当成是封接好了吗,
膜片钳电生理测量技术操作交流



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5楼2017-08-22 20:12:24
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6楼2017-08-22 20:35:21
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那半句誓言

金虫 (正式写手)


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引用回帖:
5楼: Originally posted by 姣可长点心吧 at 2017-08-22 20:12:24
我也试试用嘴吸,如果电极接触细胞,然后下压阻值增大,不给负压也能增加到GΩ,也能稳定一段时间,再把电极上升后电阻会下来,这个GΩ是怎么出来的呢?可以当成是封接好了吗,

...

如果是培养的细胞的话 是有这种情况 因为细胞表面很干净 轻轻一吸就会上吉

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7楼2017-08-23 08:49:44
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非走不可可可

新虫 (初入文坛)


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我们一般变化0.3到0.4就开始封接,比如电极接触到细胞为2Ω时,把微操调到7档,继续向下,直到电阻由2Ω变化到2.4Ω时,迅速给负压(抽吸),注意力气不要太大,当电阻过1gΩ时放掉负压(平常要是800左右我也会放掉负压,多数情况下可以上g,从而封接),封接之后,继续给负压,一定要轻轻用力,基线向上变动的时候,放开负压,重复,直到破膜为止,希望可以帮到你

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8楼2017-09-14 22:38:22
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姣可长点心吧

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 非走不可可可 at 2017-09-14 22:38:22
我们一般变化0.3到0.4就开始封接,比如电极接触到细胞为2Ω时,把微操调到7档,继续向下,直到电阻由2Ω变化到2.4Ω时,迅速给负压(抽吸),注意力气不要太大,当电阻过1gΩ时放掉负压(平常要是800左右我也会放掉 ...

请问为什么要放掉负压?不是持续给负压直到测定结束吗?我施加负压的时候阻值上升的特别慢,头疼的是,达到400M,显微镜观察细胞膜就模糊了。请问前辈封接的时候遇到过这个问题吗?一般达到GΩ需要多长时间

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9楼2017-10-07 15:25:45
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