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lwk5716

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 关于酵母双杂交(单杂交)的问题

各位虫友:我有一个关于酵母双杂交(单杂交)的问题,那就是自己的目的基因与AD或BD载体连上后,转入酵母菌中,那融合蛋白一定表达吗?或者表达的蛋白一定是有活性的吗?我以前做过真核表达实验,感觉有些蛋白到了酵母中也不是一定有表达,是不是原理不太一样?求解答
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踏透遍野的青

新虫 (小有名气)

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lwk5716: 金币+3 2017-05-20 00:28:27
酵母双杂交系统利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白-蛋白的相互作用。单独的BD虽然能和启动子结合,但是不能激活转录

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2楼2017-05-19 18:50:12
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踏透遍野的青

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lwk5716: 金币+3 2017-05-20 00:28:39
酵母单杂交方法是根据DNA结合蛋白(即转录因子)与DNA顺式作用元件结合调控报告基因表达的原理来克隆编码目的转录因子的基因(cDNA)。该方法也是细胞内分析鉴定转录因子与顺式作用元件结合的有效方法

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3楼2017-05-19 18:55:58
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1215216349

新虫 (小有名气)


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所以要筛选阳性克隆
Nice to meet you!
4楼2017-05-24 20:27:12
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sun就是太阳

金虫 (小有名气)


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楼主你好:我最近想做酵母单杂交实验,但是实验室没有相关材料,不知道楼主能否寄送一份材料,万分感谢!!!
。。。。。
5楼2017-07-06 22:45:28
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木元雨

新虫 (著名写手)

6楼2018-05-23 22:38:12
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宜方城池怀念

新虫 (初入文坛)

7楼2018-10-12 08:30:34
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