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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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赵一霏

新虫 (初入文坛)

[求助] 病毒RNA提取已有5人参与

Trizol法提取组织中的病毒RNA，病料在砚鉢中用PBS研磨，然后离心，在上清中取200微，加1000Trizol.。。。然后测OD值。260/280=1.88浓度360多！但是反转录！PCR就是不出条带！请问大神，病毒的RNA用Trizol能提吗？给提一些提病毒RNA的建议吧！

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1楼2016-12-21 21:31:02
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王王王超超超

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-22 07:39:16
TRizol法很难提取病毒的rna,即使提出来，量也是很少的 ，你可以尝试提病毒rna的专门试剂盒。试试，希望能帮你解决。

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2楼2016-12-21 23:54:43
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sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-12-22 07:39:33
trizol提组织中的总RNA还可以，病毒的话估计量太少，你是提的总RNA，然后逆转录，然后再扩增你的目的基因吗？内参基因能扩出来吗？

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知识就像蒲公英的花儿一样，播种在世界的每一个角落。
3楼2016-12-22 00:09:47
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jurkat.1640

铁杆木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
细胞里的RNA没问题。
如果是dsRNA，RT-PCR要特殊一点。
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4楼2016-12-22 08:50:06
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吃瓜的半仙

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

trizol法提取病毒rna不太容易，我们实验室一般提取用试剂盒的多，biog和qiagen用的效果都还行。
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5楼2018-12-17 09:39:35
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用Trizol能提病毒的RNA，个人比较赞同楼上观点还要需要从提量下手，我们实验室用BIODAI提取法处理的样本量可以达到1000μL，我看到其他论坛的同学提到也是用Trizol提取的，只是RNA容易降解
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6楼2019-01-03 13:21:40
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

Trizol对高浓度的病毒RNA是可以提取出来的，但是对于低滴度的病毒，回收率很不理想。
推荐使用Qiagen的Qiaamp Viral RNA mini kit （货号：52904），也可以使用一些国内的病毒RNA提取试剂盒，其中有些效果比Qiagen这个要强。
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核酸提取与Taqman诊断
7楼2019-01-03 13:51:29
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