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cheng201618

新虫 (初入文坛)

[求助] 各位前辈 我想问下用trizol提取血清中的RNA,血清和t...已有4人参与

各位前辈 我想问下用trizol提取血清中的RNA,血清和trizol的用量为多少呢? @youlinglyw

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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cheng201618(youlinglyw代发): 金币+3, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩 2016-07-29 17:49:13
200uL血清加1ML的trizol。
采菊东篱下,悠然见南山。
2楼2016-07-27 07:58:48
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youlinglyw

版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

一般标准操作都是1ml的trizol。
至于血清量,看个人了。我估计需要摸一个。
天行健
3楼2016-07-29 17:48:57
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soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党

【答案】应助回帖

如果是Trizol@LS,液体样品体积:Trizol@LS体积=1:3
刚刚去网上下了Trizol的系列说明书
其实这些都很简单,网上检索一下都会有
4楼2016-08-01 01:55:31
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般都是1ml的trizol,50-100ul的样本提取就可以了吧,我是使用biog试剂盒提取血清RNA,50ul洗脱液洗涤下来,小提量的浓度也就12ng/ul.
5楼2018-12-05 14:41:12
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主血清是新鲜的还是冻存的?如果是冷冻的需要完全解冻之后再加Trizol,通常Trizol和血清的比例是1:1,也可以稍多加一些Trizol,少加些血。混匀之后放置10分钟左右,直接加三氯甲烷混匀再去离心,可以不用先离心去沉淀之后再加三氯甲烷。我们实验室用BIOG CFRNA EASY KIT离心技术提取RNA比Trizol要简便些,楼主需要注意如果用Trizol每个步骤操作要快,用的时间药短些,防止RNA降解,异丙醇沉淀的时候,放-20°C的冰箱半个小时,或再适当延长一点时间。迅速离心,之后加75%乙醇。只洗一遍,洗2遍易损失部分RNA。不要过分干燥,管内稍有点残余的乙醇也没关系。干燥一会就迅速加DEPC水少量。提取RNA之后迅速反转录成cDNA再保存
6楼2020-02-19 14:07:21
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