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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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稻香田虫

新虫 (初入文坛)

[求助] TG酶活力的测定方法?已有1人参与

TG酶活力的测定方法?买的TG(谷氨酰胺转氨酶)酶都是微生物谷氨酰胺转氨酶(MTG)吗?
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roger524

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
稻香田虫: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 很专业 2017-03-09 17:59:46
首先,TG没的检测:
氨酰胺转氨酶活性检测方法    
1 原理 
这个实验是用来检测从Streptoverticillium mobaraense 的发酵液中用乙醇提 取所得酶的酶活力。谷氨酰胺转氨酶的活性,可通过测定CBZ-Gln-Gly 与羟胺反 应生成氧肟酸的量来计算。  
2 待测酶液的制备 
2.1 将适量的样品溶解于大约45ml 0.2M 的Tris-HCl 缓冲液(pH6.0)中,室温搅拌30min 混合均匀; 
2.2 将上述溶液用0.2M 的Tris-HCl 缓冲液(pH6.0)定容至50ml;  
3 检测方法 3.1 样品管 
3.1.1 取0.2ml 待测溶液于试管中,37±1℃恒温水浴预热1min; 
3.1.2 加入2ml 底物溶液(37±1℃恒温水浴预热10min),并立即混匀; 3.1.3 37±1℃条件下准确反应10min; 3.1.4 加入2ml 显色溶液终止反应; 
3.1.5 反应终止后,将反应混合液3,000rpm 离心10min; 3.1.6 取上清,以水作对照,于525nm 波长处测定其吸收值,为待测酶液吸收值。 
3.2 空白管 
3.2.1 将0.2ml 反应溶液和2ml 显色溶液混合均匀,在37±1℃恒温条件放置 10min; 
3.2.2 加入2ml 底物溶液,并混匀,混合液于3,000rpm 离心10min; 

第二:TG酶有几种来源,看你,买的是那种TG酶,有动物提取的,也有微生物发酵出来的
发酵工作
2楼2017-01-13 14:28:47
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hemaowei

金虫 (小有名气)

标准曲线做出来斜率是多少啊?谢谢。
3楼2020-02-25 11:36:36
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会叫的研狗

新虫 (初入文坛)

请问加入显色液后为什么会有混浊呢

发自小木虫Android客户端
4楼2021-12-30 16:33:31
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