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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ 稻香田虫: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 很专业 2017-03-09 17:59:46
首先,TG没的检测:
氨酰胺转氨酶活性检测方法
1 原理
这个实验是用来检测从Streptoverticillium mobaraense 的发酵液中用乙醇提 取所得酶的酶活力。谷氨酰胺转氨酶的活性,可通过测定CBZ-Gln-Gly 与羟胺反 应生成氧肟酸的量来计算。
2 待测酶液的制备
2.1 将适量的样品溶解于大约45ml 0.2M 的Tris-HCl 缓冲液(pH6.0)中,室温搅拌30min 混合均匀;
2.2 将上述溶液用0.2M 的Tris-HCl 缓冲液(pH6.0)定容至50ml;
3 检测方法 3.1 样品管
3.1.1 取0.2ml 待测溶液于试管中,37±1℃恒温水浴预热1min;
3.1.2 加入2ml 底物溶液(37±1℃恒温水浴预热10min),并立即混匀; 3.1.3 37±1℃条件下准确反应10min; 3.1.4 加入2ml 显色溶液终止反应;
3.1.5 反应终止后,将反应混合液3,000rpm 离心10min; 3.1.6 取上清,以水作对照,于525nm 波长处测定其吸收值,为待测酶液吸收值。
3.2 空白管
3.2.1 将0.2ml 反应溶液和2ml 显色溶液混合均匀,在37±1℃恒温条件放置 10min;
3.2.2 加入2ml 底物溶液,并混匀,混合液于3,000rpm 离心10min;
第二:TG酶有几种来源,看你,买的是那种TG酶,有动物提取的,也有微生物发酵出来的 |
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