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六界玄灵

木虫 (小有名气)

[求助] 绝对定量PCR标准曲线绘制问题

刚开始做功能基因的绝对定量,目的基因确定导入质粒中,也经过普通PCR验证过,扩增没有杂带,扩增曲线还可以,但是熔解曲线不知道是什么情况,后期做的一次扩增曲线比上图还要好,熔解曲线前一部分没有任何杂峰,最后出现的峰图不知道什么意思,请大神不吝赐教!谢谢啦

绝对定量PCR标准曲线绘制问题
捕获1.PNG


绝对定量PCR标准曲线绘制问题-1
捕获.PNG@biostar2009@飞约疯人院@wizardfan@youlinglyw
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qx4117

银虫 (小有名气)

楼主的扩增曲线很漂亮,不知道楼主做的是不是DNA的绝对定量?我也做功能基因的定量,但是梯度稀释的质粒,Ct值都很接近啊,想问一下楼主质粒浓度是多少,稀释的梯度又是多少,不胜感激。
2楼2018-01-03 15:47:00
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Jianxiao_H

金虫 (正式写手)

你扩增子多大?
多少辛酸不可告人。
3楼2018-01-04 00:41:17
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