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未纯化PCR能直接转化测序么

作者 454278916
来源: 小木虫 200 4 举报帖子
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200bp左右序列,单条带,很亮,连接转化后蓝白筛选,白斑篮斑都有,挑选了10个左右白斑测序,测序结果都是空的,是不是这样做转不进去呢 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • fuyuandj86

    楼主的问题听不懂。是说PCR产物没纯化除去PCR的缓冲液,就直接用T4连接酶和相应的缓冲液做连接吗?

  • 454278916

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-02-26 13:25:21
    楼主的问题听不懂。是说PCR产物没纯化除去PCR的缓冲液,就直接用T4连接酶和相应的缓冲液做连接吗?

    emm...差不多吧,就是从PCR仪拿出来直接去做连接转化了,没用试剂盒纯化或者切胶回收

  • fuyuandj86

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by 454278916 at 2021-02-26 17:09:52
    emm...差不多吧,就是从PCR仪拿出来直接去做连接转化了,没用试剂盒纯化或者切胶回收...

    一般来说是做不出来的。不过这都不碍事儿,一天的工夫自己重新做一遍就好了

  • 454278916

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-02-27 09:57:52
    一般来说是做不出来的。不过这都不碍事儿,一天的工夫自己重新做一遍就好了...

    好的好的

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