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细菌/培养基/蛋白质含量

作者 21817085
来源: 小木虫 300 6 举报帖子
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请问有人测过细菌在培养过程中培养基的蛋白质含量的变化吗?细菌培养一段时间后,离心取上清,我用考马斯亮蓝测上清液的OD595nm,发现OD值没什么变化,是为什么呢?谢谢

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  • 精华评论
  • 小冀-

    这个很难说明问题吧,培养基里面的蛋白会被分解利用,但是细菌死亡之后也会释放蛋白质,这样测只能看个大概吧,感觉说明不了问题,除非培养基中的蛋白质含量培养前后有明显的差别

  • 21817085

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by 小冀- at 2021-02-26 13:25:24
    这个很难说明问题吧,培养基里面的蛋白会被分解利用,但是细菌死亡之后也会释放蛋白质,这样测只能看个大概吧,感觉说明不了问题,除非培养基中的蛋白质含量培养前后有明显的差别

    虽然细菌死亡会释放蛋白质,但理论上蛋白质消耗量比释放量多,毕竟细菌在生长,对吧?但是按照这个理论,我测不出蛋白质含量的变化,是因为检测方法的问题吗?还是离心完要进行蛋白质纯化

  • 小冀-

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by 21817085 at 2021-02-28 14:04:51
    虽然细菌死亡会释放蛋白质,但理论上蛋白质消耗量比释放量多,毕竟细菌在生长,对吧?但是按照这个理论,我测不出蛋白质含量的变化,是因为检测方法的问题吗?还是离心完要进行蛋白质纯化?...

    蛋白质不需要纯化,直接测就行。蛋白浓度怎么样?不会是在本底反应的误差范围内吧?如果不是的话,会不会是大分子蛋白,菌株根本不能利用或利用量很小

  • 21817085

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by 小冀- at 2021-03-01 10:10:08
    蛋白质不需要纯化,直接测就行。蛋白浓度怎么样?不会是在本底反应的误差范围内吧?如果不是的话,会不会是大分子蛋白,菌株根本不能利用或利用量很小...

    培养基的蛋白质菌株肯定能利用吧?我没有测具体的浓度,直接测了od值,因为只是想看一个变化的趋势。做蛋白表达的时候不是要做蛋白纯化再测浓度吗,我在想是不是因为培养基里的其他物质影响了蛋白质的检测。

  • 21817085

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by 小冀- at 2021-03-01 10:10:08
    蛋白质不需要纯化,直接测就行。蛋白浓度怎么样?不会是在本底反应的误差范围内吧?如果不是的话,会不会是大分子蛋白,菌株根本不能利用或利用量很小...

    培养基的蛋白质菌株肯定能利用吧?我没有测具体的浓度,直接测了od值,因为只是想看一个变化的趋势。做蛋白表达的时候不是要做蛋白纯化再测浓度吗,我在想是不是因为培养基里的其他物质影响了蛋白质的检测。

  • 小冀-

    引用回帖:
    6楼: Originally posted by 21817085 at 2021-03-01 15:30:48
    培养基的蛋白质菌株肯定能利用吧?我没有测具体的浓度,直接测了od值,因为只是想看一个变化的趋势。做蛋白表达的时候不是要做蛋白纯化再测浓度吗,我在想是不是因为培养基里的其他物质影响了蛋白质的检测。...

    一般培养基的氮源就是无机氮和类似蛋白胨这种蛋白水解物,都是多肽或者氨基酸,很少有提供完整蛋白配置培养基的吧

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