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核糖体功能相关基因以及内参蛋白的疑惑

作者 mochenmi
来源: 小木虫 200 4 举报帖子
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请教各位大神,我研究的基因敲除后导致细胞内核糖体异常,细胞整体蛋白翻译过程受阻。
现在想证明突变体比野生型细胞内总蛋白含量减少,所以打算提取等量组织的总蛋白,有个困惑是内参蛋白如何选择,因为内参蛋白也是核糖体合成的。如何选择内参蛋白证明我提取的组织量是一致的呢?
或者有别的试验能够证明核糖体相关功能受阻呢? 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • fuyuandj86

    可以放一个立春红染WB膜的图片证明总蛋白量一样。

  • fuyuandj86

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by mochenmi at 2020-10-31 01:18:49
    谢谢回复,现在的问题是突变体总蛋白含量就比野生型减少,并不是某一个蛋白含量减少。
    举个例子,我同样裂解1g样品,严格采用相同步骤,突变体获得的总蛋白含量只有野生型的1/3,如何让别人相信这个结果,而不怀疑 ...

    总蛋白一样的情况下,用放射性同位素标记或荧光检测单位时间内新合成的蛋白,可以证明翻译速率变慢

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