1.确认细胞的培养液是否正确。2.确认培养皿（瓶）的材料是否正确。3.确认你要培养的细胞，是否需要在培养前，在培养皿（瓶）做coating。

1.确认细胞的培养液是否正确。2.确认培养皿（瓶）的材料是否正确。3.确认你要培养的细胞，是否需要在培养前，在培养皿（瓶）做coating。

你这是啥细胞呢，我觉得最大可能是你消化时间太长，把细胞弄死了，有的细胞很好消化下来，大概只有几十秒，有的一般不好消化，可能要十几分钟

可找我们帮忙做

是不是用的一次性培养瓶，如果是你看看是不是密封盖？之前有一次用错瓶子里，用了密封盖也不长，换回透气盖就没问题了

你操作的时候有没有带细菌进入

听你的描述，初步判断有三种可能。一是培养皿不合格，是否在培养过程中更换了其他品牌的培养皿，建议购买其他品牌的培养皿做一组对照。二是培养基出了问题，培养基是有保质期的！而且除非操作水平过硬，经验充足，否则不建议使用粉状培养基自配溶液，买厂家配好的MEM,DMEM都够用，也不贵。三是支原体感染，会导致细胞生长缓慢，甚至逐渐漂浮死亡，建议加大支原体抑制剂浓度并做支原体检测，出现污染立马更换菌株，不要犹豫，救不活的，