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大肠杆菌平板计数，涂板不长菌

作者 sy0621: 来源: 小木虫 1400 28 举报帖子

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目前在做大肠杆菌平板计数实验，原菌液测Abs=0.8，可是稀释一系列梯度后，将溶液混匀取100uL涂板，37℃孵育后不见长菌，请问是什么原因呢？（用灭菌的0.9%氯化钠稀释）返回小木虫查看更多

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精华评论

金刚太郎

平板和摇瓶培养基成分是否一致？稀释液是不是不合适？（我都是用用磷酸缓冲液稀释的，效果很好）
sy0621

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2楼: Originally posted by 金刚太郎 at 2019-10-16 12:52:58
平板和摇瓶培养基成分是否一致？稀释液是不是不合适？（我都是用用磷酸缓冲液稀释的，效果很好）

一样的，你用的PBS吗？pH=7.4吗？用水可以吗？
安静de执着14

是不是稀释度太高了？一般用LB培养基就培养大肠杆菌，你用的什么培养基？大肠杆菌是营养缺陷型还是野生型？
sy0621

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4楼: Originally posted by 安静de执着14 at 2019-10-16 13:55:35
是不是稀释度太高了？一般用LB培养基就培养大肠杆菌，你用的什么培养基？大肠杆菌是营养缺陷型还是野生型？

蛋白琼脂膏和肉汤，稀释度很低了，原菌液也没长菌，营养缺陷型，可以用灭菌水稀释吗？
sy0621

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4楼: Originally posted by 安静de执着14 at 2019-10-16 13:55:35
是不是稀释度太高了？一般用LB培养基就培养大肠杆菌，你用的什么培养基？大肠杆菌是营养缺陷型还是野生型？

蛋白琼脂膏和肉汤，稀释度很低了，原菌液也没长菌，营养缺陷型，可以用灭菌水稀释吗？
张香玲1017

平时也用0.9%氯化钠溶液稀释，没有什么问题，一考虑是不是选择的稀释倍数不合适，建议先从-1到-10（或其它）试试;二考虑是不是培养时间上不够，平时培养24+-1hr，可以增加到48hr试下。
sy0621

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7楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2019-10-16 14:03:11
平时也用0.9%氯化钠溶液稀释，没有什么问题，一考虑是不是选择的稀释倍数不合适，建议先从-1到-10（或其它）试试;二考虑是不是培养时间上不够，平时培养24+-1hr，可以增加到48hr试下。

目前试了10-1到10-8都没长菌，孵育2天也没有，稀释液换成灭菌水应该可以不会让细菌死掉吧
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