流式细胞仪对微藻和细菌分别计数求教
我在进行细菌和微藻的混合培养,看到文献中都是用流式细胞仪进行计数,他们做的是酵母和微藻,利用微藻叶绿素自荧光区分二者。
我的这个菌也有叶绿素,而且我要做异养培养,后面不能合成叶绿素。
请问我应该怎么设置参数去计数呢?
两者有显著大小区别,荧光染色之后,使用SSC对FSC作图。
可是我没用过流式细胞仪,咨询负责仪器的老师他说他也不知道计数是怎么操作的
求大神可以指教一下哈!
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我在进行细菌和微藻的混合培养,看到文献中都是用流式细胞仪进行计数,他们做的是酵母和微藻,利用微藻叶绿素自荧光区分二者。
我的这个菌也有叶绿素,而且我要做异养培养,后面不能合成叶绿素。
请问我应该怎么设置参数去计数呢?
两者有显著大小区别,荧光染色之后,使用SSC对FSC作图。
可是我没用过流式细胞仪,咨询负责仪器的老师他说他也不知道计数是怎么操作的
求大神可以指教一下哈!
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要么用大小区分,要么选各个荧光通道。先用纯菌,包括自养前后的,找出来差异。有色素等话,都会有很多荧光。总之要找出来差异。后期分选也要要啊……计数,分选,单细胞组,整数据,写文章
分析分选,欢迎讨论。
是不是可以TOP3染色,FL-1和FL-4图,按照红荧光和绿荧光进行区分,最好还是按照大小进行区分但是找到合适的阈值有点难~~欢迎指导
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建议以小的设置阈值
不是的,你看看你fcm有多少通道,找出特异性再说
细菌很多时候用前向不行,无法和培养基中的噪音区分开,什么都看不到