在发酵罐上,生物发酵优化条件,实验重复不出来,揪心啊~
培养基配方,抗生素,诱导剂都没变,在发酵罐上优化完最优条件,再重复最优条件就重复不出来了。种子液培养结束之后PH,OD都是和之前一样,没看出什么问题。甘油管使用也是最新转化不到一个月的。最终在发酵罐上重复酶活就相差很大。离谱得都相差一两千(U/L)了。关键是在发酵罐上面发酵液的生长趋势还是那么滴好,没看出什么抑制了。
揪心~大神们,我该怎么办
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培养基配方,抗生素,诱导剂都没变,在发酵罐上优化完最优条件,再重复最优条件就重复不出来了。种子液培养结束之后PH,OD都是和之前一样,没看出什么问题。甘油管使用也是最新转化不到一个月的。最终在发酵罐上重复酶活就相差很大。离谱得都相差一两千(U/L)了。关键是在发酵罐上面发酵液的生长趋势还是那么滴好,没看出什么抑制了。
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发酵产品的大生产放大时的条件需要重新摸索
酶活是几万的相差一点正常,还有需要考虑所用诱导剂、培养基等原料是否统一批次能否保证质量
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估计宿主导致质粒不稳定或突变,建议换宿主重新转化。