各位前辈，我想要向MG1655里插入一段片段，这个片段好长，有4000多，请问用pKD46质粒的话，能插进去吗？谢谢！！ 返回小木虫查看更多
应该是可以的，如果不得行，可以选择分步插入
你选择一个目前研究过，对其正常生理代谢无影响的非必须基因就可以啦
用pKD46和线性DNA片段的话不好插，片段太大。我插过大片段的序列，做了好多次都没成功，最后换做Cas9插入进去的
如果片段上有抗性的话，很容易插入片段
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应该是可以的，如果不得行，可以选择分步插入
谢谢！！可以再请教一下，一般怎么选择MG1655的插入位置呢？我了解到应该是找一个不是特别重要的基因，用待插入的片段代替之。那怎么找MG1655的这种基因呢？谢谢
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你选择一个目前研究过，对其正常生理代谢无影响的非必须基因就可以啦
好的好的，谢谢！请问有介绍怎么设计同源臂，FRT位点的资料吗？不过为啥我想给您评分送金币，显示您不是应助贴啊？
用pKD46和线性DNA片段的话不好插，片段太大。我插过大片段的序列，做了好多次都没成功，最后换做Cas9插入进去的
如果片段上有抗性的话，很容易插入片段