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CRISPR Cas9双质粒系统中pTarget质粒的消除

作者 Timy123
来源: 小木虫 650 13 举报帖子
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我用IPTG诱导含有双质粒的菌,长起来之后划线,再挑菌验证,结果接到K和Sp抗性的试管都长了,按理来说消除掉pTarget的菌不应该在sp抗性的试管里生长了,有消除这个质粒经验的大神吗?谢谢

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  • 精华评论
  • biosci

    多传代几次,才能把质粒彻底消除

  • JM109

    楼主好,我也在做这个,想问下你第二个质粒是用何种方法转化到宿主的

  • 粽子君

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by Timy123 at 2018-12-27 21:48:12
    谢谢~
    ...

    楼主,你好,我也遇到这个问题,请问你最后是怎么解决的?

  • 小木无虫

    很好消的,我做的基本都是很容易就消除了

  • 粽子君

    引用回帖:
    6楼: Originally posted by 小木无虫 at 2019-10-10 19:20:51
    很好消的,我做的基本都是很容易就消除了

    我敲第一个基因也是很好就消除了,但是敲第二个基因的时候,尝试了不同浓度的IPTG诱导,传代4次,都不能消除pTarget,请问你可以详细说说是怎么消除的吗?谢谢啦~~~

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