我的引物为什么一直跑不出条带
(Sense primer) 5' GAAGTGGGTTGGTGAAAGA 3'
(Anti-sense primer) 5' AGGAAGAAATGAGAATGCC 3'
上下游引物的5'端都有保护碱基和酶切位点，引物primer5评分91，blast特异性也很好，就是跑不出条带，从48到68各个退火温度都试了，是引物有什么问题吗
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你的模板怎么样呢？有没有用其他的引物试试
查下文献 看下文献中都是用的什么引物
(Sense primer) 5' GAAGTGGGTTGGTGAAAGA 3'
(Anti-sense primer) 5' AGGAAGAAATGAGAATGCC 3'
上下游引物的5'端都有保护碱基和酶切位点，引物primer5评分91，blast特异性也很好，就是跑不出条带，从48到68各个退火温度都试了，是引物有什么问题吗
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