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启动子载体构建

作者 Anu0103
来源: 小木虫 350 7 举报帖子
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目前在构建启动子的载体,用的是pBI121, 载体构建成功后转入农杆菌(GV3101、EHA105)之后,用菌落PCR验证,要么是二聚体,要么没有条带,请问有人知道是怎么个情况吗? 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • snhajn

    做对照了吗?对照条带怎么样

  • Anu0103

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by snhajn at 2018-08-20 15:26:26
    做对照了吗?对照条带怎么样

    没有对照,用什么做对照

  • snhajn

    可以用转入农杆菌的质粒做模板,p一下

  • 我欲乘风归去

    做菌液PCR试试,拿几个1.5ml或者2ml的管子装500ul含有抗性的培养液挑入几个菌落过夜培养,取100ul放入新的管子,离心弃上清加入等体积的灭菌水混匀,80°金属浴10分钟后再做PCR检测,前体是你要确定你的载体构建成功了。你可以用构建好的载体质粒为模板做阳性对照,水为模板做阴性对照。

  • 蝶恋花5280

    再提农杆菌的质粒再p,或者提高退火温度

  • 是个甜豆豆呀

    你的载体确定成功了吗?农杆菌确定转成功了吗?

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