请问大家，这是Xbridge C18柱子的原因还是？
大家好，才接触HPLC没多久。最近在做山药中尿囊素的含测。我用的是waters的Xbridge C18。之前摸了一些条件，流动相比例甲醇：水（4：96），柱温30，流速0.4，7.3分钟左右出峰，走出来的峰形还可以，见图1。但是没多久柱子就出现了问题，走的尿囊素标准品峰有肩峰，我查了资料，考虑可能是前筛板堵了，就把柱子反过来用低流速0.5冲了两个小时，之后正过来继续用，然后标准品的峰是好了，但是之前的条件也重复不出来了。样品中尿囊素总有肩峰，怎么都改善不了。我都把流动相调成99%甲醇了，也不行，调成40℃柱温也不行。总之我能想的办法都用了，无奈新人小白，黔驴技穷了。请问各位大神，我该怎么办？柱子有没有坏啊？
希望大家帮帮忙，不胜感激，谢谢！
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京公网安备 11010802022153号
用纯有机相冲色谱柱试一下，把休息里面的物质都冲洗出来再试试
XBridge 是没有内嵌极性基团的，不喜欢低于5%有机相的流动相。你试试用90%有机溶剂低速冲过夜。
，
以后可以考虑柱前加个预保护柱
柱子的问题，柱前段容易脏，低流速反冲时间长点，或者直接倒着用。