放线菌怎么做PCR?
我是本科生一枚,在做放线菌的分离鉴定,有几个问题想求助各位大佬,望各位不吝赐教,在下感激不尽。放线菌做PCR一定要提取DNA吗? 不提DNA,PCR能做成吗? 我同学做细菌PCR没有提取DNA,直接用菌悬液做PCR,只有一般的成功率,请问下什么因素会影响PCR成功率?怎么提高成功率?我用液体培养基培养出的放线菌基本上都是一个一个的菌落,和我同学的不一样,没有形成菌悬液,请问下怎么取菌液做PCR,是取上清液?或者要进行其他的处理? 返回小木虫查看更多
今日热帖
我是本科生一枚,在做放线菌的分离鉴定,有几个问题想求助各位大佬,望各位不吝赐教,在下感激不尽。放线菌做PCR一定要提取DNA吗? 不提DNA,PCR能做成吗? 我同学做细菌PCR没有提取DNA,直接用菌悬液做PCR,只有一般的成功率,请问下什么因素会影响PCR成功率?怎么提高成功率?我用液体培养基培养出的放线菌基本上都是一个一个的菌落,和我同学的不一样,没有形成菌悬液,请问下怎么取菌液做PCR,是取上清液?或者要进行其他的处理? 返回小木虫查看更多
可以把菌悬液,沸水煮一下,然后再pcr就可以了
我做的放线菌液体培养基里长得是一个一个的小菌落,是取单个菌落做PCR还是取液体做PCR
,
变性的时间延长一下,用phu酶看看
放线菌菌悬液里都是菌丝球,没有液氮,还能用别的方法把菌丝球打碎破壁吗
放线菌,很难用煮沸法破壁,估计你这个成功率可能与此有关,推荐金属浴吧,试试120度或者更高一点试试。另外可以用液氮研磨或者干冰也行的。