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质粒双酶切(大神留步帮帮忙)

作者 native
来源: 小木虫 250 5 举报帖子
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为什么质粒酶切前浓度很大,切完以后个位数。
酶切位点是NdeⅠ和XhoⅠ
我酶切2小时,以后放-20了,第二天怎么让他继续切
酶加多,星活力是什么

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  • 精华评论
  • 渊博震天

    你所说的酶切前浓度很高是用仪器测的吧?我建议你直接跑个胶用肉眼预估一下浓度再合理调整酶切体系。

  • 渊博震天

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by native at 2018-06-05 08:06:13
    对,用仪器测的,谢谢您?
    ...

    我用的小量质粒提取试剂盒,菌液为8ml的,以我自身酶切实验为例,我用的takara的quick cut 酶,每次体系为20ul,质粒DNA加入量为16ul,酶各加1ul,buffer 2ul,同时切5管跑胶回收

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