请教GPC测定多糖分子量图谱分析
最近做了GPC测定分子量，现在把图和得到的数据贴出来，希望大神能稍微系统讲讲，金币不多，还望见谅。
分离纯化的是一种多糖，想要测定它的分子量，并看看纯不纯，采用了GPC-MALLs测定，流动相0.1M硝酸钠，流速0.4ml/min，样品用流动相溶解后稀释为0.2mg/ml，但是过膜0.45um流出一部分后就推不动了，我只好分次过收集滤液做为样品，进样环进样量是1ml。
有以下问题不是很懂：1.贴出的几个图分别都有什么信息值得采纳或者参考？ 2. 样品的峰为什么比较宽（参考文献显示样品含有不少糖醛酸），样品纯吗，样品峰后面的小峰是样品还是杂志或者其他？ 3. 除了知道了分子量，如何知道结果好不好，这些图表能说明什么问题？感觉不弄清楚，心里很虚。非常感谢大神能赐教，谢谢！
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京公网安备 11010802022153号
需要你确认几个问题，流速0.4是根据什么选择的？如何消除峰展宽效应？浓度0.2又是什么原因？我还没有见过分析色谱使用1ml进样环的，你的是制备色谱？如果是计算分子量的话，还是建议使用分析色谱哦
楼主的三个问题，基本都是相关的，除了分子量，还有什么信息可以看出来？
gpc图最直观的有三个信息，出峰时间，峰的数量，峰的宽度。我的观点是对应分子量，纯度，分子量离散程度。
过滤膜推不动，说明样品溶解不好，可以预先加热，还有柱温是多少？进量环100μml就可以，1ml的一般用来测样品dn/dc值。问题回答：1.图一是整个出峰结果，可以根据峰形、峰数、保留时间判断样品大概情况，峰越靠前分子量越大，峰越窄越尖分子量分布越窄；图四是准确的结果分析，主要看数均分子量Mn、重均分子量Mw和分子量分布系数Mn/Mw，分布系数越小，样品的相对分子量大小越均一。2.样品峰比较宽，因为你样品分子量分布较大（多糖链之间长短不一，长短相差较大），Mn/Mw=2.91也说明了这一点, 图一没看出什么杂峰应该是比较纯的，更准确结果应再打个核磁和液谱；后面的小峰及倒峰一般是溶剂峰。3.GPC常用用于测高分子聚合物的分子量及分布情况。
非常感谢你的回答。提取的多糖是用常温提取的，所以就没有加热，柱温用了35℃，因为学院配置的就是1mL的进样环，估计不是很好改动，进样体积很有影响吗？
柱子是 OHpark SB-805 HQ 仪器是Wyatt SEC-MALS 1. 流速0.4是因为流速太大可能导致柱压太高，平时其他人做时都采用的这个流速，所以推荐我用这个流速。2. 浓度也是参考了文献和其他做过的人，然后因为不好过滤，我又进一步稀释到0.2，这个浓度是太小了还是太大了。 3. 进样环是因为仪器配置的就是1ml，也不方便更换，进样量的影响是什么呢？我看文献里也都是uL
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非常感谢您的解答。你说的这几个，我都理解了，我想进一步知道的是如何看这个峰，比如我的图1中，有一个很大的主峰，后面又有些小峰和倒峰，是因为什么原因呢？有没有什么方法可以改善或者纠正。还有图二和图三有什么侧面的信息可以参考或者使用。