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奇怪的配胶现象

作者 半点心
来源: 小木虫 350 7 举报帖子
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配SDS-PAGE的时候出现的种种怪现象
1:分离胶配完之后用水压线,胶凝了之后会出现两条线。。。。。。
2:如果溴酚蓝没跑出去就停止电泳,溴酚蓝距胶底的地方竟然染不上色
3:胶脱不了色
4:胶放在水里会膨胀

以上种种怪问题,有大神解答吗? 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • 嗨皮开心果

    下层分离胶做好了,建议用移液枪吸取无水乙醇沿着玻璃板滑过添加,一般2毫升就足够了。至于你跑胶需不需要将loading蓝色跑出来,建议你用预染蛋白marker,可以根据marker跑开程度以及你目的蛋白大小来判定是否可以停止。至于你的染色问题,我个人觉得是看你的染色液是否是回收重复利用的,如果是建议增加染色时间。

  • 嗨皮开心果

    其实一般用蒸馏水都可以给胶脱色,脱色液一般是75ml的甲醇,225ml的冰乙酸,加蒸馏水定容至1L。有个快速脱色办法就是在沸水里煮蛋白胶脱色。

  • 半点心

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by 嗨皮开心果 at 2018-04-13 16:07:57
    其实一般用蒸馏水都可以给胶脱色,脱色液一般是75ml的甲醇,225ml的冰乙酸,加蒸馏水定容至1L。有个快速脱色办法就是在沸水里煮蛋白胶脱色。

    我们一般就是加点水,再加点乙醇,这样就脱色有点慢。想要快的话,我也会加点冰醋酸

  • 半点心

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by 嗨皮开心果 at 2018-04-13 16:03:27
    下层分离胶做好了,建议用移液枪吸取无水乙醇沿着玻璃板滑过添加,一般2毫升就足够了。至于你跑胶需不需要将loading蓝色跑出来,建议你用预染蛋白marker,可以根据marker跑开程度以及你目的蛋白大小来判定是否可以停 ...

    是的,我的marker是预染的marker,溴酚蓝跑不跑出来都可以,一般我都跑出去。就是唯一的一次没跑出去,竟然染不上色。染色问题,我有两块胶一起染的,一起脱的,竟然一块脱得了色,一块脱不了

  • 半点心

    引用回帖:
    6楼: Originally posted by 嗨皮开心果 at 2018-04-14 14:31:39
    你可以试试我的脱色液配方。
    ...

    冰醋酸那么多不刺鼻吗

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