最近做一个外源基因在谷氨酸棒杆菌中的表达,采用EPO培养基制备谷氨酸棒杆菌感受态细胞。步骤为,菌种划线,挑菌落lbg试管过夜摇,转接到EPO培养基中,但是转接后菌就不长了,条件是30℃,220rpm。也按照英文文献,试过18℃28h,还是不生长 返回小木虫查看更多
一级种子可以试试菌液接种
感受态细胞培养基营养可以丰富一些,加点脑心浸液。
你这个应该是突变菌株吧,建议首先划线,然后一级种子液,转接到二级种子液,再到EPO,其中EPO和种子液营养可以丰富一些加点脑心浸液。然后电转条件也有讲究,包括电压、时间、后培养基。
一级种子可以试试菌液接种
-80冻存的菌液可以直接用来接种子液的,我们一直是这样做
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我们是实验室所有的菌都这样,并不局限于哪一种菌
感受态细胞培养基营养可以丰富一些,加点脑心浸液。
你这个应该是突变菌株吧,建议首先划线,然后一级种子液,转接到二级种子液,再到EPO,其中EPO和种子液营养可以丰富一些加点脑心浸液。然后电转条件也有讲究,包括电压、时间、后培养基。