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谷氨酸棒杆菌感受态细胞制备

作者 糊涂蛋的日常
来源: 小木虫 600 12 举报帖子
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最近做一个外源基因在谷氨酸棒杆菌中的表达,采用EPO培养基制备谷氨酸棒杆菌感受态细胞。步骤为,菌种划线,挑菌落lbg试管过夜摇,转接到EPO培养基中,但是转接后菌就不长了,条件是30℃,220rpm。也按照英文文献,试过18℃28h,还是不生长

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  • 精华评论
  • 小冀-

    一级种子可以试试菌液接种

  • 小冀-

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by 糊涂蛋的日常 at 2018-04-12 14:27:20
    我是用的负80℃冻存的菌液来划线的
    ...

    -80冻存的菌液可以直接用来接种子液的,我们一直是这样做

  • 小冀-

    引用回帖:
    5楼: Originally posted by 糊涂蛋的日常 at 2018-04-13 10:33:32
    你是指做谷氨酸棒杆菌还是其他的菌啊
    ...

    我们是实验室所有的菌都这样,并不局限于哪一种菌

  • 莫等闲111

    感受态细胞培养基营养可以丰富一些,加点脑心浸液。

  • 莫等闲111

    你这个应该是突变菌株吧,建议首先划线,然后一级种子液,转接到二级种子液,再到EPO,其中EPO和种子液营养可以丰富一些加点脑心浸液。然后电转条件也有讲究,包括电压、时间、后培养基。

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