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重组质粒pYES2转化酵母H1246,挑取单菌落进行pcr,没有目的条带

作者 感觉要延期哎
来源: 小木虫 400 8 举报帖子
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制作酿酒酵母H1246感受态,用醋酸锂法转化重组质粒pYES2后,用尿嘧啶缺陷型的SC培养基加2%葡萄糖筛选,30度培养48小时后,长出白色单菌落,挑取单菌落到10微升无菌水中,98度加热10分钟,取2微升进行pcr,跑胶发现点样孔很亮,但没有目的条带,查了查说是蛋白挂孔,p了两次都没有目的条带,会是假阳性吗?因为是第一次做,很多东西都不懂,请各位大神帮帮忙

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  • 精华评论
  • Neo2000

    酵母菌落PCR不容易出结果,可以考虑抽质粒后检测,不过一般情况下,只要培养基过关了,都是阳性的

  • 糖糖666

    好像有有些污染,我看着像

  • 糖糖666

    原来是这样的,我以为是菌落污染了所以单个菌落很少,你下次再多稀释一个梯度进行点样,这样分离的单菌落会更好,一般平板点样的菌落控制在200到300间比较方便观察

  • 叁贰壹

    熟悉

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