小木虫

当前位置：首页 > 微生物 >500ml M9培养基培养大肠杆菌，菌液变的偏绿，有酸臭味，OD600很难达到1

500ml M9培养基培养大肠杆菌，菌液变的偏绿，有酸臭味，OD600很难达到1

作者 小花龙牙草: 来源: 小木虫 650 13 举报帖子

最近用M9培养基培养Rosetta（DE3）菌种，先用5mlLB复苏冻存的甘油菌，复苏完在转到50ml M9中培养过夜，这一步是能长起来的，但是菌液已经开始有点偏绿酸臭了。再将这50ml的菌液转到大瓶M9中培养，摇了20多个小时，OD600才长到0.6，菌液也变得比较绿酸臭了。

以前也做过M9表达是正常的，搬到新实验室就做不出来了，不知道是为什么。求助返回小木虫查看更多

今日热帖

精华评论

xiecj

为啥我在m9中长的细菌基本上只能到0.2？
小花龙牙草

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiecj at 2018-01-02 13:55:09
为啥我在m9中长的细菌基本上只能到0.2？

啊？一般大肠杆菌在M9可以长的，只是比LB中长的慢一些。我以前做的，一般大约10个小时就能长到1.0了。如果想让菌长的快一些，可以加一点LB。

那你的长到0.2能用于表达蛋白吗？
xiecj

不是，我的大肠在LB中长的很欢乐，但是M9中几乎不怎么长，对了这个细菌的品系是pbr322
小花龙牙草

引用回帖:
4楼: Originally posted by xiecj at 2018-01-02 14:51:37
不是，我的大肠在LB中长的很欢乐，但是M9中几乎不怎么长，对了这个细菌的品系是pbr322

那是不是这个品系有啥基因缺陷，然后培养基里又缺少某种特定的营养，就长不起来了啊？我也不是很懂
xiecj

我的M9是买的，当时一直长不起来，我问技术也是说培养基长的很好，很奇怪
skull123

我觉得第一步复苏后至少要用平皿接下菌，看看是不是纯的，确保是纯的在到50ml扩大培养，种子液都不做纯粹检测就扩大培养是很不靠谱的一件事情
小花龙牙草

引用回帖:
7楼: Originally posted by skull123 at 2018-01-02 16:07:24
我觉得第一步复苏后至少要用平皿接下菌，看看是不是纯的，确保是纯的在到50ml扩大培养，种子液都不做纯粹检测就扩大培养是很不靠谱的一件事情

因为我在用M9前，先用大瓶LB摇是正常表达的，然后再做M9的就不正常了，所以就没想到菌可能有问题。之前一直以为是不是培养基灭菌没灭干净，或者是BME有问题

我涂个板看看，谢谢帮助
，