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基因敲除细胞阳性纯和子筛选

作者 清风寨
来源: 小木虫 500 10 举报帖子
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本人现在想做了基因敲除的细胞,想了想我的载体上除了荧光没有其他筛选标记也没有抗药性  。想分出阳性细胞可是我所知道的只有用96孔板来稀释 ,这是很笨的方法不知各位高手有没有好的方法。另外敲除的细胞很大可能是杂合子 等位基因还能表达 ,我只想得到纯和子 不知各位有什么好的办法  谢谢 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • asznpb

    1.你敲除的是什么细胞?动物?植物?真菌?还是细菌?如果是后两个不大需要考虑是否纯合子的问题,植物的么,笨方法就是不断的自交,拿到纯合子,动物细胞没做过,不了解,
    2、不过我觉得你可以试一下用流式细胞术加细胞分拣,这方面的文献应该有不少,就是基于荧光进行细胞分拣的,

  • asznpb

    额。植物和微生物都做过,细胞还真不知道……没做过啊

  • hf2016

    坐等答案揭晓

  • 清风寨

    大家帮帮忙啊

  • 红多多

    我见别人用的PCR的方法筛选的,他们用的是插入失活的方法,用微量的RT-PCR的盒子在96孔板里面直接拿单克隆筛选,你是不是也可以这样试试?

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