我是新手，第一次过柱分离，有很多问题向大家请教。
手头现有6g样品，是75%乙醇提取后，乙酸乙酯的萃取层。我想要的目标产物只能用活性检测来确定。
1)跑了tlc挑选系统，用过PE-CHCL3, EtOAc-MeOH， hexan-acetone。PE-CHCL3没有跑开，就换作EtOAc-MeOH，EtOAc-MeOH的点跑得分不开，很大的拖尾，就换成hexan-acetone，结果如照片所示。第一张是荧光254nm,第二张是荧光365nm（板子上标的是H:M，标错了，应该是H:A）。请问这样可以用来作为上柱洗脱剂的条件了吗？如果梯度洗脱的话，要怎样来安排洗脱的梯度？还有硅胶溶胀用什么试剂比较好？



2)现在想过硅胶柱。实验室硅胶是230-400目的。实验室柱子型号有3种：2.7×40； 1.9×40； 3.5×80。请问用什么试剂溶胀硅胶？根据我的样品量，用哪种柱子比较合适？
3）因为不知道目标产物的具体位置，只能梯度洗脱后，检测活性。在网上也看了一些，有的人用砍断洗脱，说是节约试剂和时间，请教这个砍断洗脱是什么意思？还有的人用A100-A99B1-A98B2-A95B5-A90B10-A70B30-A50B50-B100 梯度洗脱，请问哪种洗脱方式要好些？

谢谢，希望有经验的高手不吝赐教。

[ Last edited by xiaohei504888 on 2011-6-15 at 13:41 ] 返回小木虫查看更多