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关于甘油作为唯一碳源高密度发酵培养BL21

作者 xuzhengnjut
来源: 小木虫 350 7 举报帖子
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打搅各位,交流一个实验问题:我用BL21(DE3)表达一个45KDa的蛋白,因为该蛋白是糖代谢中的一个酶,因此用葡萄糖做唯一碳源的时候生长很紊乱,为了解决这个问题我用甘油作为唯一碳源,在5L罐子做高密度培养,现在的问题是菌体吃甘油速度很慢,生长速度也很慢,但是我在很多文献中都看到大肠杆菌利用甘油也是很厉害的,而且生长很好。我目前发酵24小时OD只能做到20左右,我感觉很不正常,哪位做过甘油为碳源的大肠杆菌发酵能够指点一下?谢谢

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  • 精华评论
  • wt3532

    大肠杆菌使用纯甘油作为碳源没问题啊,小罐子接种5%左右,接种4h就能达到OD=20(当然跟菌本身也有关系,部分大肠生长速度会慢一些)
    有机培养基、无机培养基都试过,问题不是很大。

    实在不行我觉得你可以LB中加1%甘油试一下看大肠能不能生长起来,

  • Mr.XXX

    发酵罐配方里还有各种盐和胰蛋白胨的

  • John_Q

    初始甘油3g/L,后续补料流加时保证罐内不要超过这个浓度,涨到个140的OD问题不大吧

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