小木虫

当前位置：首页 > 微生物 >聚丙烯酰胺凝胶电泳问题的讨论

聚丙烯酰胺凝胶电泳问题的讨论

作者 秦川萝卜头: 来源: 小木虫 850 17 举报帖子

大家好，我在做蛋白质电泳时遇到一个很棘手的问题，我的电泳一共点了四个样，为什么脱完色后，出现了两条带，且这两条带都是一横条，横跨胶的宽度，我点这四个样时也有间隔啊，为什么最后都连起来了啊！我的问题在哪啊？求助...... 返回小木虫查看更多

今日热帖

精华评论

necilyx

上样量是不是太大了~~
小冀-

是不是插梳子时不够快，导致没有凝胶槽啊…
小冀-

是不是插梳子时不够快，导致没有形成可用的凝胶槽啊…
秦川萝卜头

引用回帖:
2楼: Originally posted by necilyx at 2012-03-01 16:48:32:
上样量是不是太大了~~

我现在怀疑我的样品制备是不是有问题，我想测我的细菌是否代谢脂肪酶，我想测菌悬液中是否含脂肪酶，我想电泳检测一下，样品该怎么制备啊？能不能直接拿菌悬液跟上样缓冲混合后直接点样啊？谢谢
秦川萝卜头

引用回帖:
2楼: Originally posted by necilyx at 2012-03-01 16:48:32:
上样量是不是太大了~~

我现在怀疑我的样品制备是不是有问题，我想测我的细菌是否代谢脂肪酶，我想测菌悬液中是否含脂肪酶，我想电泳检测一下，样品该怎么制备啊？能不能直接拿菌悬液跟上样缓冲混合后直接点样啊？谢谢
necilyx

引用回帖:
6楼: Originally posted by 秦川萝卜头 at 2012-03-01 23:58:11:
我现在怀疑我的样品制备是不是有问题，我想测我的细菌是否代谢脂肪酶，我想测菌悬液中是否含脂肪酶，我想电泳检测一下，样品该怎么制备啊？能不能直接拿菌悬液跟上样缓冲混合后直接点样啊？谢谢

脂肪酶应该是胞内酶，应该破碎细胞再提蛋白，加缓冲液混合变形后上样，菌液直接混合缓冲液上样跑蛋白我还真没做过~~
，
秦川萝卜头

引用回帖:
7楼: Originally posted by necilyx at 2012-03-02 10:09:37:
脂肪酶应该是胞内酶，应该破碎细胞再提蛋白，加缓冲液混合变形后上样，菌液直接混合缓冲液上样跑蛋白我还真没做过~~

提蛋白？我先前用过硫酸铵盐析法提蛋白，但是蛋白不溶于缓冲液呀？不知该怎么办，因为我是学化学的对这方面不是很懂，希望您能耐心指点指点谢谢