【求助】求助：液相，流动相问题？
WATERS HPLC不知道出现了什么问题，峰面积重现性很不好。
用了两个样品，样品名保密，条件分别是(1)C18柱;流动相：甲醇-水 70：30;流速：1.0ml/min;室温;进样量：20微升(2)C18柱;流动相：甲醇-水-冰醋酸 40：60：0.02%;流速：1.0ml/min;室温;进样量：20微升。这两个样品的方法学已经经过确认是可以完全分离样品的。两个样品的结构不相似，分子量不大。峰形还可以的，一个略拖尾，对称因子为1.18，另一个更好一些，均没有过载现象。峰面积自动积分和手动积分RSD约为7%-10%。
上礼拜工程师来过，检查结果表明，自动进样针的进样量是准确稳定的。
另外，实验过程中，柱子的压差比较大，并且不稳定，在流速为 1.0ml/min时约80psi。曾经怀疑是系统内混入了气体，但是经过长时间低流速冲洗，重现性仍然不好。系统内和柱子也没有漏液的现象。
这究竟是为什么呢???急切期待各位高人的指教!!!
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怎么没大侠帮忙啊？
柱子用了多久啦？是不是该换了
流动相的脱气没有出现问题，也在怀疑是系统内的气泡，正冲着
忽大忽小的，没有什么规律……怀疑是系统内气泡，正在冲，下午再做一下重现性看看结果如何吧！其实前面用的两个样品稳定性也不错的，下午又换了一个更稳定的，但愿会好吧！
同一根柱子，用甲醇-乙腈-水为流动相，流速为1.0ml/min，柱子的压差为33psi左右，用纯甲醇，流速为1.0ml/min，柱子的压差为 25psi左右，可是一换成甲醇-水和甲醇-水-冰醋酸，柱子的压差就马上变的很高了，并且在更换流动相的过程中，柱子没有动过……这是为什么呢
，
换其他的柱子试试，看看是不是柱子问题，或者检测器的问题。还有样品是否在流动相中分解的问题。柱子压力不稳可能是泵的问题，泵头拆下超超。
我怀疑是泵里面进了气泡了！
说下我的想法吧～
如果你的柱压比正常情况小，而且波动比较剧烈的话估计是泵的问题，可能有小微粒，可以在泵前后接注射器冲洗一下看看。
甲醇加上水后流动相粘度变大，压力也随之变大，这种现象正常