小木虫 --- 700万学术达人喜爱的学术科研平台

首页 >> 有机 >>有关氨基酸的合成反应

有关氨基酸的合成反应

大家好,最近在做氨基酸的合成实验,用的原料是氨基保护的缬氨酸(Fmoc-NH-Val)和没有任何保护的苯丙氨酸(NH2-Phe-OH)。做法是:
    首先,进行缬氨酸(Fmoc-NH-Val)的酰氯化,采用室温下往(DCM做溶剂)Fmoc-NH-Val滴加氯化亚砜(SOCl2),然后转移到50°C油浴中反应4小时蒸发掉溶剂和SOCl2的方式生成酰氯。酰氯真空干燥2h后待用。反应液TLC分析 如下图.1所示。出现原点有一个大点,然后爬上去的有一个点和Fmoc-NH-Val对应,原料点上面还有比较小的点不知道是什么。问题:原点的为何物?,酰氯是原料点上面很小的点吗?(流动相 乙酸乙酯:甲醇4:1)。。。。
    然后就是酰氯Fmoc-NH-Val-Cl和苯丙氨酸的反应了:(姑且认为第一步生成的是酰氯),我试过好几次反应始终找不到目标物生成:Fmoc-NH-Val-Phe-OH。以下是几次反应:(图2为何Phe反应过后的TLC)
    ①将苯丙氨酸加入一定量的DCM二氯甲烷中,不能溶解,然后滴加几滴吡啶做缚酸剂搅拌,然后把第一步得到酰氯用少量的DCM溶解,滴加到苯丙氨酸体系中,50°C油浴过夜,过滤掉不溶物,浓缩后加少量甲醇溶解,然后加0.01mol/L的HCL,析出大量粘稠物,离心干燥后薄层分析,始终发现不了目标产物TLC分析主要成分仍是原料Fmoc-NH-Val。
    请各位有经验的分析一下原因(用DCM溶解Phe是看到有帖子说两相也可以反应,溶解少量的Phe反应完后接种溶解),不知这样合不合理。。
   ②也尝试过用水相溶解Phe,在水相中反应,由于依据酰氯及其活泼,Phe-NH2优于H2O和酰氯反应,一直也没做成功。我试过用NaOH水溶液溶解Phe,然后将做的酰氯干燥成粉末加入搅拌,发现Fmoc-NH-Val-Cl酰氯在水相中不能溶解,成均匀分散相,最后HCl酸化后得到固体,干燥后仍然得不到目标产物,TLC分析主要成分仍是原料Fmoc-NH-Val。
    同时我也改进过用四氢呋喃溶解酰氯Fmoc-NH-Val-Cl,由于四氢呋喃和谁可以互溶,结果刚滴加到水相(NaOH水溶液)中立马有白色沉淀生成,pH试纸检测溶液为中性(原来为碱性,怀疑有HCl生成中和了碱所致),最终过滤沉淀,溶液浓缩都不能发现目标产物,TLC分析主要成分仍是原料Fmoc-NH-Val。
     疑问????:请问各位我该如何改进方法,由于每次投料只有100~200mg,料比较少,DCM做溶剂做酰氯时DCM没有进行除水(分析纯,显示含水量0.05%),始终怀疑酰氯都没有做成功。还有如果用水相溶解Phe时,NaoH水溶液的pH应该如何控制,已经重复试验多次,始终没成功,请大家给点建议,不胜感谢!!!:hand::hand::hand::hand:
      谢谢各位了。。。。

TLC.png

TLC2.png  返回小木虫查看更多

今日热帖

相关话题

用户评论

噫,前两天看师兄也在做类似的,他用邻苯二甲酸酐保护的6-氨基己酸,然后做成酰氯去反应,也得不到想要的东西,很奇怪

没做保护的氨基酸会形成内盐,所以一般的有机溶剂都难溶,理论上小部分溶解的氨基酸会参与反应,然后继续溶解继续参与反应,没有接肽试剂存在,也不会发生苯丙氨酸自己和自己缩合的情况,但这不好说。既然你已经有了Fmoc保护的缬氨酸,为什么不试试先用二氯亚砜和甲醇把苯丙氨酸酯化,然后再做接肽。酯化后的苯丙氨酸甲酯是盐酸盐,将其悬浮在有机溶剂里,加碱就能游离出来了。

给你个方法你试试,正常的Fmoc-Val-OH用DCC(1.5)、HOSu(1.1-1.3)活波酯之后滤掉DCU,苯丙氨酸和碳酸氢钠(2-3eq)溶液,应该可以的,不要再做什么酰氯了

4楼: Originally posted by chenbaitu at 2017-10-11 22:28:21
给你个方法你试试,正常的Fmoc-Val-OH用DCC(1.5)、HOSu(1.1-1.3)活波酯之后滤掉DCU,苯丙氨酸和碳酸氢钠(2-3eq)溶液,应该可以的,不要再做什么酰氯了
谢谢您的回复,不过您说的活泼酯后滤掉DCU不太明白,还有后面的苯丙氨酸和NaHCO3(2-3eq)溶液时怎么回事,是用NaHCO3的碱性溶液做溶剂溶解Phe吗,还有前面处理的Fmoc-Val-OH如何加入碱性溶液呢,能不能具体一点,谢谢啦!:D

4楼: Originally posted by chenbaitu at 2017-10-11 22:28:21
给你个方法你试试,正常的Fmoc-Val-OH用DCC(1.5)、HOSu(1.1-1.3)活波酯之后滤掉DCU,苯丙氨酸和碳酸氢钠(2-3eq)溶液,应该可以的,不要再做什么酰氯了
您好,请问(1)”正常的Fmoc-Val-OH用DCC(1.5)、HOSu(1.1-1.3)活波酯之后滤掉DCU“指的是用什么溶剂??tlc检测Val反应完了就过滤吗?
(2)”苯丙氨酸和碳酸氢钠(2-3eq)溶液“这里的溶剂是什么?碳酸氢钠的水溶液?溶剂量是多少?几个mol每个升啊?
多谢,

楼上说的就是做成Fmoc-val-osu 再反应。

猜你喜欢

学术必备
与600万学术达人在线互动!


扫描下载送金币