拟南芥Kan抗生素筛苗，发芽后不长啦1
万能的虫友们，又来请教了，还是老问题，一直没有解决，不知道问题出在哪里，请高手或过来人指导一二。
我收取用农杆菌侵染花序转化过的拟南芥种子，室温或37培养箱干燥几天，然后75%酒精灭菌20分钟左右。蒸馏水清洗3-5遍，泡在水里面，4度放2-3天。然后涂布在含有50ug/ml的MS平板上。
若干天后，发现拟南芥明显比同时期别人种的长的慢，长的小。如下图所示。关键是我不止一次遇到这种情况，严重影响我做实验的心情，要知道我基本上都喜欢自己干的，实在不知道哪里出了问题。
是我的种子灭死了? 但是它会发芽呀.
是我的Kan浓度太高了？我和别人用的一样呀。
是我的培养基太硬了？我们都是一样的配方，倒完板子都吹干采用的。难道是吹的太干了？
有人说是板子不透气，我用的是专门用于培养植物的一次性厚的培养皿，这个基本可以排除。
实在想不出哪里出了问题，特来求助，请万能的大神给些意见，谢谢。
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IMG_20170305_181351.jpg室温或37培养箱干燥几天，然后75%酒精灭菌20分钟左右。蒸馏水清洗3-5遍，泡在水里面，4度放2-3天。
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自己顶一下
照的不清楚，苗太小，根本分不出来是否有阳性苗。但总该有一颗的，所以还是哪里出了问题了。
祝福，帮顶
顶
你这个种子种了多久了？要是只有要是不到两个星期，再放放，要是两个多星期就把kan浓度降低一点
首先，我不知道你的侵染做的怎样，看你讲的应该做过，且效果应比较好。关于筛苗，这种情况下我也曾经遇到过，我是因为光照度过大，温度有点高（ps 我是直接在培养架上做的，没有恒温箱）。不过，你的Kan浓度并不高，我试过75ug/ml的，如果有阳性植株是可以看出来的。
另外，关于灭菌方法各个实验室不同，我的protocol是按照Xiuren Zhang 的做的（doi:10.1038/nprot.2006.97）：75%酒精灭1min， 5% NaClO 灭5-10min，