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【求助】巯基dna与纳米金的连接问题

作者 ht300: 来源: 小木虫 500 10 举报帖子

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在nacl老化过程中总是出现聚沉，nacl浓度到0.1M时候，现象是由红色变淡紫色，离心后金胶无法再溶解，看了mirkin的文章好像梯度升盐生到0.3M,求助大家有做过的吗，出来指点一下返回小木虫查看更多

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精华评论

ssyyll1019

引用回帖:
Originally posted by ht300 at 2011-03-07 16:24:46:
在nacl老化过程中总是出现聚沉，nacl浓度到0.1M时候，现象是由红色变淡紫色，离心后金胶无法再溶解，看了mirkin的文章好像梯度升盐生到0.3M,求助大家有做过的吗，出来指点一下

要么是你的DNA 没有连接上或是连接量不够的。
在修饰巯基DNA 是你可以试着在胶体金溶液里加入一定量的非离子表面活性剂，这样胶体金就对盐离子有一定的抗性，防止胶体金的团聚，而且在老化的时候，增加盐离子的浓度，从而增加DNA的连接量！
fanger

那是金纳米团聚了！盐度太大！在保证金不足量时，盐度增加的速度太快，可选择多次少量的加盐！因为金纳米对盐很敏感
yuguanggui

除了上述离子强度的影响外
PH值的作用也是比较大的
巯基DNA的加入有可能会改变溶液的PH值
建议做一个PH梯度摸索一下反应的最适PH
lixiang1642

引用回帖:
Originally posted by ht300 at 2011-03-07 16:24:46:
在nacl老化过程中总是出现聚沉，nacl浓度到0.1M时候，现象是由红色变淡紫色，离心后金胶无法再溶解，看了mirkin的文章好像梯度升盐生到0.3M,求助大家有做过的吗，出来指点一下

我之前做过几次,在0.5xTBE buffer里,5nm的金,dna过量200倍,以0.05M NaCl/3h的速度加NaCl,没有什么问题...可以到0.5M都稳定.

200倍是dna链和纳米金颗粒的摩尔比

[ Last edited by lixiang1642 on 2011-5-19 at 10:31 ]
，
lixiang1642

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Originally posted by ht300 at 2011-03-07 16:24:46:
在nacl老化过程中总是出现聚沉，nacl浓度到0.1M时候，现象是由红色变淡紫色，离心后金胶无法再溶解，看了mirkin的文章好像梯度升盐生到0.3M,求助大家有做过的吗，出来指点一下

之前的帖子里有同学说过要用tcep或dtt活化巯基dna。你可以试一下。我没有活化也能work，但不知道你的情况是不是不太一样。
ht300

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Originally posted by fanger at 2011-05-03 17:30:08:
那是金纳米团聚了！盐度太大！在保证金不足量时，盐度增加的速度太快，可选择多次少量的加盐！因为金纳米对盐很敏感

一般用什么调节ph？我看文献用醋酸盐缓冲液，但没有具体什么醋酸盐，醋酸钠缓冲液应该对金纳米有影响的啊