【求助/交流】有谁用过bioteke的RT-PCR premixture?我怎么连标线都做不好呢?
RT. 有哪位虫友用过百泰克的RT-PCR premixture?质量怎么样?
最近我一直用百泰克的2倍SYBR Real-time PCR Premixture做绝对定量的标准曲线.效果很差.梯度稀释为10^8至10^2基因拷贝数.标准曲线在10^8至10^5次之间标准曲线拟合的还算可以,R2为0.992,但4次到3次方之间的点就非常差劲了.Ct值基本在16-22之间变动.几乎不能检测更低的拷贝数的标准品.
别人用我的定量PCR仪都蛮好的,Ct值可以到30多都没有问题.为什么我的就不行?是不是百泰克的RT-PCR premixture质量有问题?导致无法测定较低浓度的模板?还是有其他原因.请各位虫友帮忙.BB奉送!
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关键的还得看你每个点的重复情况
每个点的平行都很好.几乎没有差异.
请您再次指点哈!
变动是什么意思，那就把图发上来看看吧
要不把对应的表格发上来也行
楼主最后做的怎样啊，我现在也在做这个，也是标准曲线做不好，怎么办？
如果做细菌总基因的定量PCR，建议不要用百态克的普通定量pcr mix
，
请问你现在做的怎么样了，我也是标准曲线建立不好！
换了别的，没用这个玩意了。