菜鸟一枚,要做免疫荧光,但是什么都不懂,用的是一个合成蛋白,想定位这个蛋白,不知道如何选择一抗,这个蛋白与猪内蛋白功能性片段相同,一抗该怎么找呢,求指导 返回小木虫查看更多
最好加个标签吧,你这个蛋白片段和胞内蛋白还有相同序列,不加标签,很容易混啊,没法说明定位情况啊。个人认为共聚焦效果更理想。
你这个简单啊,蛋白上带标签啊,用标签抗体定位就可以了
蛋白已经拿到在手上了,不知道怎么加标签,老板让用间接免疫,可是是人工合成,没有物种来源,找不到相应的一抗,不懂怎么办了
最好加个标签吧,你这个蛋白片段和胞内蛋白还有相同序列,不加标签,很容易混啊,没法说明定位情况啊。个人认为共聚焦效果更理想。
你这个简单啊,蛋白上带标签啊,用标签抗体定位就可以了
蛋白已经拿到在手上了,不知道怎么加标签,老板让用间接免疫,可是是人工合成,没有物种来源,找不到相应的一抗,不懂怎么办了
首先不知是您的表示不准确还是我理解能力差,你说的我有点模模糊糊的。首先和你确认几点,
1、你说的合成蛋白是什么意思?是化学合成的多肽,几个到10几个氨基酸的那种短肽么?还是那种构建表达载体,导入到大肠杆菌或者酵母等等表达系统中表达出来大的含有几百个氨基酸的蛋白?
2、蛋白如果是短肽的那种,那么很抱歉,可能没有现成的抗体卖,需要你找我们这种公司定制一个特异性的抗体。但如果是第二种,是通过构建质粒在表达系统中表达的蛋白,那么在表达的时候构建载体的时候选择相应的标签(例如his,gst,flag等等),那么就选择相应的标签的抗体就好了。
关于如何选择抗体,我如果解释下什么是抗体你可能就不会迷糊了。首先抗体是外源物质(可以是蛋白质或者细菌,甚至是化合物分子)进入某个动物体内,动物免疫系统产生的能特异性识别并结合该外源物质的一种蛋白质。外源物质是指这个物质不是这个动物体能本身含有的,比如鼠的蛋白不会让鼠产生抗体,但是把鼠的蛋白打到兔子体内就能产生抗体了。总之,如果抛开上面这句话,抗体是识别这个蛋白的蛋白,和什么物种来源没关系,在选择一抗的时候只要找针对该蛋白的抗体,只有确定了一抗,并确定了一抗是哪种物种的再考虑选择二抗吧。
如果有兴趣了解抗体定制可随时联系哈
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