可能是我孤陋寡闻了  8min的胰酶消化还是头一次听说（我们一般都是不到1min）

好像不用细胞刮刀，加入0.25%的胰酶消化，在吸出胰酶，随后换上新鲜的血清（血清可以一直胰酶的活性），就OK啦！

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3楼: Originally posted by jiangronglu at 2013-06-05 09:56:27
好像不用细胞刮刀，加入0.25%的胰酶消化，在吸出胰酶，随后换上新鲜的血清（血清可以一直胰酶的活性），就OK啦！

我试过不用细胞刮刀，用胰酶消化，但需要很长时间，对细胞损伤较大，并且很难吹下来

ATCC上推荐用细胞刮刀的，你可以试试。我们平时养这个细胞都是用刮刀的。

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5楼: Originally posted by 爱知识-圆圆 at 2013-06-21 10:20:20
ATCC上推荐用细胞刮刀的，你可以试试。我们平时养这个细胞都是用刮刀的。

谢谢回复，我最近在养这个细胞，遇到一些问题，刚买回来的细胞长得比较快，二次复苏后的细胞只能传四代左右，而且细胞都是养一段时间后出现伪足，渐渐地细胞发生裂解，最后细胞状态越来越差。我处理的方法是用胰酶消化4分钟，待细胞变圆后，用细胞刮刀处理，将其刮下传瓶。但是细胞一直养不好，希望能传授一下养该细胞的经验，不胜感激！
QQ:897623508
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6楼: Originally posted by 强子fighting at 2013-06-23 13:00:11
谢谢回复，我最近在养这个细胞，遇到一些问题，刚买回来的细胞长得比较快，二次复苏后的细胞只能传四代左右，而且细胞都是养一段时间后出现伪足，渐渐地细胞发生裂解，最后细胞状态越来越差。我处理的方法是用胰酶 ...

你还是使用了细胞刮刀，为什么在之前还要用胰酶呢，增加对细胞的损伤。你从哪里买的细胞？买回来的时候是什么样的形态？

我用的细胞刮刀，感觉挺好的。ATCC也是这样推荐的。也有人推荐用弯头吸管把细胞吹下来。我试过，确实可以，但损失挺多的。