6%变性聚丙酰胺凝胶电泳SSR引物筛选
我是SSR引物筛选新手，有好多问题呀，请各位高手指点迷津~
（1）我是跑的六一厂24B型号，很小的那种垂直电泳槽，染色时胶要与玻璃板脱离，我做的是1mm的6%变性聚丙烯酰胺凝胶，在固定、染色、显色的过程中要转移凝胶，胶很容易就弄碎了，请问有什么好方法可以防止胶块碎裂啊？
（2）我用的500ml的显色液，将两块胶一起染色，显色液中包括15g的Na2CO3，750ul的甲醛溶液和50ul的硫代硫酸钠，我是先将Na2CO3溶解在500ml的蒸馏水中，放入冰箱冷却，拿出来后再加入甲醛和硫代硫酸钠。在显色过程中显色不均是什么原因啊？就是条带有的出现的早有的出现的晚，最后导致有的染的特别深，有的染的特别浅。
（3）我用的方法都与之前师兄师姐跑的那种最大的玻璃板是一致的，只是因为胶更小，所以我用的试剂都按一定比例缩小了，就如上面的显色液的配方，缩小了1/4，这样做可行吗？
问题还有很多，急需各位帮助，谢谢啊！
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京公网安备 11010802022153号
1、“胶块碎裂”是不是你配制的胶有问题。配方是不是存在问题。
2、显色有深有浅，不知道是不是你的胶厚薄不均一？这种情况在我们实验室也出现过。
3、缩小了1/4是什意思？浓度应该还是没变的，只是按比例减少而已。
1.我的配方是1LPAGE中含420g的尿素和150ml的丙烯酰胺/双丙烯酰胺（19:1）原液，100ml的10xTBE。之前师姐跑大板是用的这个配方，她用着没问题。但我也不清楚换做我这种小板会不会有什么问题···
2.‘胶的厚薄不一’我觉得应该不可能，我两块玻璃之间都是由一样厚度的胶条隔开的，下方没有放胶条，除了插梳子的那一面我都用胶带封好了，也没见漏胶.在凝胶时也感觉放平了···
3.就是浓度没变，只是按比例减少的意思。不知道这样转移使用本身有木有问题···
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1.胶易破碎，可能是因为染色-冲洗-显色等步骤，摇晃力道太大以及转移次数太多。我所有过程只用一个塑料盒，放到摇床上低速摇动，一帮不会烂胶，你可以试试。
2. 染色深浅不一，还是因为染色或显色液不能均匀覆盖胶块，建议一个槽中凝胶不要放的太多，染色液特别是显色液尽量多些，使胶块充分地浸在水中。
3. 染色/显色液的浓度本来就是可以调节的，只要能显出清晰的条带，就没有问题，可以继续使用。
嗯，今天打算这样做，谢谢！
谢谢~