取出冷却后向各管加入5ml甲苯充分振荡，以萃取红色物质。静置待分层后吸取甲苯层以“0”管为对照在波长520nm下比色。

混合不均匀，可以将试管加塞上下反复倒置混合均匀，静置分层时塞子不宜塞紧

请问楼主解决没有啊，我也遇到了这个问题，甲苯层没有什么颜色，光度值特别低

是不是冷却时间过长？我现在是甲苯层颜色有变化，但是溶液透明度不一样导致测量出来值与浓度无关，现在标准曲线做不出来都。