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大肠杆菌计数求指导

作者 Lcandy
来源: 小木虫 700 14 举报帖子
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第一次接触微生物培养,买的是大肠杆菌纯菌种,第一次用大肠杆菌计数,做了9个板子,梯度分别是10-4,10-5,10-6,现在培养48小时后,出现了很多小点儿,哪位大神能帮我鉴定下这算培养成功了么,可以用来计数么?求指教,谢谢!

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  • 精华评论
  • 害虫啊害虫

    一点点拙见,大肠杆菌是一种白色的圆点,表面会略有凸起,感觉湿湿的,你这个挺像的。但是第一个板子感觉像是染杂菌了。
    还有就是同一个板子上,假如说长的不一样,有可能是混有杂菌。
    大肠个人感觉很皮实,26,37摄氏度都能长,我都用37培养,感觉24小时绝对能长成你第二张图片中大的圆点那么大。
    不知道你做计数是为啥,感觉大肠浓度能够达到10的7,8 次方,所以可以多稀释一下做,要不计数太麻烦。
    感觉48小时不至于长这么小啊,是不是培养基问题?pH值差太大?

  • 害虫啊害虫

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by Lcandy at 2017-08-12 10:48:30
    对了,我还想请教下,如果板子混有杂菌还能用来计数么?
    ...

    混杂菌的真没有试过计数,这里个人认为涉及到 不同的菌群生长会相互抑制一般。 所以结果可能会不准确。
    你测试毒性的话,可以把你的水样过0.2的滤头,这样就把里面的菌除去了,单纯剩下的就是水样了,然后水样与稀释过后的菌按照比例混合,可以试试。
    不知道我表达的你是否理解。我举个自己的例子,我是做药物的,将药物融于水后,也会混有杂菌,所以过滤头,得到的就是无菌的溶液,然后用这个溶液来与菌混合涂板子。
    你的水样感觉也是类似的

  • snoopytbw

    显然平板稀释法做的不对啊。首先,非大肠对照木有。。。。空白对照木有。。。。其次,平板浇筑没有无菌操作,污染,琼脂烧制过程没有烧透,还有部分颗粒。。。。建议培养基烧开后,121,20min灭菌。浇筑要在洁净台内做!。第三,平板稀释浓度不成梯度,可能原因是稀释后没有混匀,每个浓度多做几个平行组。混好后盖盖子漩涡震荡下。涂布的时候加样要固定,常规都是加100-200ul。然后用各向划线,或者十字划线,尽量密集,重复几次。平板需要正置10min后倒置放在培养箱里面。再试试吧,平板计数比较崩溃,不小心就根本做不了

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