测定药物释放曲线是否可以用在比色皿底部放置纳米颗粒的方法？
我想使用介孔硅纳米颗粒载药，由于样品的量很少，1mL左右，感觉不太适合用透析的方法测释放曲线，查了一下文献，看到一篇08年的JACS是这么测定的：
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The dye-loaded, stoppered particles (15 mg) were placed in the corner of a cuvette before carefully adding HEPES buffer (50 mM, 12 mL, pH ) 7.5). To open the snap-tops, a solution of PLE [0.12 mL, 10 mg/mL in 3.2 M (NH4)2SO4] was carefully added while the solution was stirred. The emission of rhodamine B in the solution above the particles was measured as a function of time using a 514 nm probe beam (15 mW), both before and after addition of PLE.
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简言之，就是在比色皿底部角落放纳米颗粒，然后加入缓冲液，加入另一试剂（某种酶）后，被包裹的染料罗丹明B开始释放出来，体现在荧光强度的变化上。
这种方法的优点时对试剂样需要得少，但我的疑问是，纳米颗粒是如何在角落被放置的？加入溶剂后纳米颗粒不就被冲起来，分散在整个溶液体系中了吗？测得的荧光数据不一定是被释放出来的染料，也有可能是仍被包裹载体中的染料所发出的荧光吧？
那么测定药物释放曲线是否可以用这种方法？如果可以，具体该如何操作？欢迎讨论，谢谢
[ Last edited by oasis0709 on 2012-12-10 at 21:03 ]
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怎么没人回复呢？自己顶一下
我也遇到过这样的问题，我是这样想的，可不可以加入一点有机试剂把纳米颗粒出来，在去离心去上清测浓度，或是直接离心可不可以测，看了那个英文的，他们做的是不是时间很短的，要不是不会在比色皿中直接做的。我是这么理解的，结合您自己的实验再想想吧。
谢谢回复。
原文的意思应当是在比色皿中原位测定的，若是每一个点都离心一下那就好办了，可每测一个点就要"牺牲"一部分样品，违背了我的初衷呀
原文测定的时间确实很短，从开始到释放完，十几分钟吧
另外一篇advanced material也是这么做的
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Releasing experiments. Guest loaded Si-SS-CD was placed at the bottom of a quartz
cuvette which was then filled with PBS. After addition of GSH or DTT, the fluorescence intensity of the solution of guest loaded Si-SS-CD was measured as a function of incubation time.
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难道dox在硅球内和在硅球外的荧光还不一样吗
，
原文我没看，这个和你纳米颗粒的大小，释放速度等都有关系。如果文献里面用的是微米级的颗粒，很容易沉淀在底部，而且药物分子很小，容易释放的话，有可能就是把比色皿直接放进去，静止一段时间，颗粒沉淀在底部了，慢慢测就行了。
如果你用的介孔材料比较小，不容易沉淀的话，这个方法就不可靠，或者你是不是想办法把一个半透膜固定在靠近底部的位置，隔离你的材料。另外你在药物时间测定过程中，需要搅拌吗？如果需要搅拌，就更不能直接测量。你可以取不同的时间点，稍微离心后，把粒子沉淀在底部，吸取上清液测量。然后把测量的液体倒回去。
第三个问题，你也可以测量后在你的原始溶液里面补充相同的体积的缓冲液，然后计算的时候把你每次取出释放的药物的量叠加就行了。这样有另外一个好处。如果你药物释放的浓度比较大，每次补充新鲜的缓冲液后，相当于稀释了，更有利于介孔材料中药物的释放，这是动力平衡的问题。
你好，我也在做这个实验。
我也在考虑楼主纠结的问题，如果一次次的转移，离心，到最后材料必然会损失一部分，造成结果偏差，如果能在比色皿里做就不存在损失，过程还没那么繁琐。但是我想知道即使材料能够沉淀在底部，直接测荧光会不会对上清液的荧光强度有所影响呢？光束不会照到底部吗？
另外你说的两种方法，我觉得应该从模拟细胞环境的角度出发，药物是否会被细胞代谢掉？代谢速率如何？我不是学生物的我也不太懂，个人以为应该会代谢掉一部分，可是这个该怎么模拟呢？