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关于感受态细胞制备的疑问

作者 1006641214
来源: 小木虫 600 12 举报帖子
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一直以来做的感受态细胞转化率都不是很高,现在想问几个问题。我们一直都是用takara的感受态细胞的kit制作的。
在加入solution a和solution b的时候都有一个除尽液体,目的是为了使转化率提高,为什么,我们一般用移液枪吸出来但是不是特别干净,之前用的是滤纸,还有有什么好的方法吗?
还有就是有两个步骤需要离心,然后沉淀要让它悬浮起来接触溶液,试剂盒上面说的是用手指轻轻弹,不能剧烈震荡,这个剧烈的程度是什么,我手指甲都给弹痛了,还是没有浮起来。后面他们都是用枪抽吸混匀的,这样对吗?

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  • 精华评论
  • 1006641214

    有人有做感受态细胞经验的吗

  • 1006641214

    。。。

  • 晋鹏

    1、稍微用手指轻弹即可。

    2、对于沉淀部分,用移液枪轻轻吹打混匀,即反复吸打。

  • zhouxfd

    感受态制作关键是:
    1. 所有操作必须在4°,
    2. CaCl2 洗几遍后要让细胞孵育至少1小时在CaCl2中
    3. 细菌不要培养到stationary phase,

  • 江灵敏

    我们都是自己做的感受态,转化效率挺高的

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