重组质粒做出来杂带多
我的目标条带在2000bp左右。第一张图是菌液pcr，体系20ul,酶10 上下引物各1 菌液1ul，p出来很多杂带，目标条带有但是很弱。通过筛选，将可疑的选出来提质粒。第二张图是把菌液中的质粒提出来之后pcr，体系20ul 酶10 上下引物各1 质粒0.2，但是p出来效果跟菌液pcr效果一样。引物应该没有问题，我现在准备将质粒酶切再跑一次看看，请问我的问题出在哪里，求大神指点
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PCR应该是没有工作，可能的原因很多：
1. 质粒不对
2. 引物不特异，或有多个结合位点
3. PCR程序有问题
，
关键是你的质粒序列可不可靠，如果有全序列的话选两个酶切一下试试