我想做多黏芽孢杆菌的同源重组,敲除以及交换基因片段,应该用什么质粒?文献里有的质粒太贵,有的都没有卖……请问这方面的大神一般用什么质粒? 返回小木虫查看更多
1、pET28a。 2、PET-28a表达载体具有T7启动子及lac调控子,需要较高的IPTG起始浓度才能启动有效表达,可使用1mM-2mM,而大家平时使用的IPTG浓度一般为0.1mM,所以建议大家提高IPTG的浓度。而加入IPTG的时机,一般要求菌液OD600达到0.3-0.5时再加入,因为IPTG对于细菌具有较高的毒性,加入过早,会致使细菌生长非常缓慢,甚至死亡,
有人有相关的质粒,或者知道吗
1、pET28a。
2、PET-28a表达载体具有T7启动子及lac调控子,需要较高的IPTG起始浓度才能启动有效表达,可使用1mM-2mM,而大家平时使用的IPTG浓度一般为0.1mM,所以建议大家提高IPTG的浓度。而加入IPTG的时机,一般要求菌液OD600达到0.3-0.5时再加入,因为IPTG对于细菌具有较高的毒性,加入过早,会致使细菌生长非常缓慢,甚至死亡,
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