我们实验室是做肝癌的，现在准备筛一些药，所以想构建索拉菲尼的耐药株，查阅了一些文献，发现有两篇文献写的不太一样，想问各位学术大牛：

     1、索拉菲尼的初始浓度有要求么？我看文献上只写了低于IC50，两篇文献用的初始浓度都是1μM，但是用的细胞系不同，所以相应的IC50也不同，所以不清楚初始浓度是有一个标准呢，还是按照IC50的一定比例（比如说20%）去设定呢？

      2、构建耐药株是必须要在6孔板上么？我看有一篇是用6孔板加药培养，有一篇应该是直接用的培养瓶（因为什么都没说，而且看起来像是正常的细胞培养）

      3、请问最后结束的浓度有要求么？我看两篇文献大概都是2倍的IC50

       4、两篇文献其一做了大概3个月，其二做了长达6个月，之前养细胞的时候师兄和师姐都说，肿瘤细胞养到20代之后就不是太好了，不建议继续做实验使用或者冻存，可是这6个月的培养细胞还可以继续用么？

        5、我看两篇文章每次换药浓度上升的梯度也不一样，前者是0.25μM 后者0.1μM ，想问这个是可以根据自己的实验周期确定还是根据不同细胞系之前的实验结果，查阅文献确定呢？

       6、最后一个问题（） ：第一篇文章在前1-2周时，一直在用1μM的浓度培养（文章中说是用这个浓度刺激细胞），但是第二篇就没有这个过程，想问下这个“刺激”是必要的么？


        第一次在小木虫发帖（实际上也是第一次求助有关科学的问题）  ，而且也是刚开始接触构建耐药株方面的东西，真的是有很多很多东西都不懂，也不知道该去问谁，所以烦请各位大牛指导学生，学生感激不尽

最后上传两个实验部分的截图供大家参考


第一篇文献.png



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