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关于蛋白酶解制备多肽

作者 lhl1207
来源: 小木虫 750 15 举报帖子
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之前从网上查了很多文献,现在通过跟一位老师的交谈后感觉彻底颠覆了我之前的观念,搞得我都不会做试验了,具体情况如下,
以植物多肽制备为例(选取枸杞)
之前实验步骤是,热水浸提--酶解(此处加入果胶酶和其他蛋白酶)--灭酶--离心--过滤--浓缩--喷干。
现在老师的步骤是,热水浸提--离心(去上清液)--沉淀酶解(只加蛋白酶)--灭酶--离心--过滤--浓缩--喷干。
他的解释是热水浸提把一些非蛋白的可溶性成分溶于水中,离心后去掉上清液就是去掉了这部分可溶性成分,剩下的沉淀,与水按照一定比例混合后加酶酶解,这时候酶解的就是蛋白质了,后面按照正常的程序来实验。
这样与之前实验步骤的区别就是,之前的实验加入果胶酶或者是纤维素酶,把多糖类物质酶解成小分子了,后面喷雾干燥出来的产品中含有很多小分子糖,这样影响多肽的纯度。
现在我的问题是:热水浸提时,不是也有一部分蛋白质溶于水吗?后面去除上清液,会不会影响蛋白含量从而影响最终多肽得率
我提出过碱溶酸沉的方法得蛋白酶解,但是他说那样不合适工业化生产。
我已经一头雾水了,希望各位虫友大神帮帮忙,谢谢。 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • yu27317961

    个人觉得,首先枸杞是以多糖和类胡萝卜素为主要成分的
    应该是95%醇体,渣水提,然后渣来提取蛋白质
    但是枸杞没什么蛋白质吧
    还不如做枸杞多糖的酶切

  • 15751002461

    我也觉得枸杞里面蛋白质含量很少,最好不要做枸杞,换原料吧

  • 化工小虫子

    试试膜分离多级分离,我是做陶瓷纳滤膜的,欢迎咨询

  • lhl1207

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by 15751002461 at 2017-07-15 10:03:00
    我也觉得枸杞里面蛋白质含量很少,最好不要做枸杞,换原料吧

    我只是拿枸杞来说明一下,就是含有蛋白外其它成分比较多的一种原料

  • lhl1207

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by yu27317961 at 2017-07-14 14:20:20
    个人觉得,首先枸杞是以多糖和类胡萝卜素为主要成分的
    应该是95%醇体,渣水提,然后渣来提取蛋白质
    但是枸杞没什么蛋白质吧
    还不如做枸杞多糖的酶切

    我只是以枸杞为例,这种含有非蛋白成分比较多的原料,怎样去除非蛋白成分

  • yu27317961

    引用回帖:
    6楼: Originally posted by lhl1207 at 2017-07-18 03:53:12
    我只是以枸杞为例,这种含有非蛋白成分比较多的原料,怎样去除非蛋白成分。...

    脱脂-脱糖-蛋白质提取,
    或者树脂脱糖
    应该是套路吧

  • lhl1207

    引用回帖:
    7楼: Originally posted by yu27317961 at 2017-07-18 09:01:54
    脱脂-脱糖-蛋白质提取,
    或者树脂脱糖
    应该是套路吧...

    脱脂 脱糖怎样脱  具体的   工业化生产的话也树脂脱吗

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